Anti-ERCC1抗体,DNA切除修复蛋白1抗体
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1.一抗及标记一抗抗体 2.二抗及标记二抗抗体 3.蛋白及抗原 4.人Elisa试剂盒 5.小鼠Elisa试剂盒 6.大鼠Elisa试剂盒 7.豚鼠Elisa试剂盒 8.猪Elisa试剂盒 9.鸡Elisa试剂盒 10.各种动物Elisa试剂盒 11.植物Elisa试剂盒 12.微生物Elisa试剂盒 13.分离试剂 14.酶与辅酶 15.蛋白质 16.抗生素 17.放免试剂盒 18.各种动物细胞株、细胞系..... 等等
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抗体中英文名称:Anti-ERCC1抗体,DNA切除修复蛋白1抗体
抗体的相关标记:HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa Fluor 350,Alexa Fluor 488,
Alexa Fluor 555,Alexa Fluor 647
抗体种属有兔抗单克隆抗体,鼠抗单克隆抗体。抗体的浓度为1mg/ml。
抗体可以与人,小鼠,大鼠,鸡 ,狗,猪,羊,牛,兔等交叉反应。
抗体可以用于做石蜡切片免疫组化,冰冻切片免疫组化,Elisa,WB,免疫荧光等实验。
(公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗)
1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)
2、Immunoprecipitation [1-2 µg per 100-500 µg of total protein(1 ml ofcell lysate)]
3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution range 1:50-1:500)
4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution range 1:30-1:3000)
5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded sections) (starting dilution 1:50
dilution range 1:50-1:500)
产品试验中的显色反应:
免疫组化实验是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
显色反应(注:二抗一般有两种常用标记酶,HRP和AP,其相对应的显色底物试剂盒为DAB和BCIP/NBT,裂解液一般用发光法。)
HRP标记二抗显色, 用DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00)显色,按顺序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中,避光,混匀,将膜加入显色液中避光显色15 min左右终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。
AKP标记二抗显色,用AKP缓冲液洗膜5min,弃去AP缓冲液,加入显色液(66µlNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33µl BCIP溶液1h内使用),室温下显色(37℃可加速反应),显色反应通常在30min内可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置,可在4℃储存一年以上。
产品WB实验中的对照系统:
Western bloting首先是要将电泳后分离的蛋白从凝胶中转移到NC膜上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。 Western bloting是用来对蛋白质进行检测的一种常用方法,通过抗原抗体的免疫反应可以定量测出抗体的相对分子量,以及抗体的相对丰度或与已知抗原的关系等等。目前它应用在多个领域,在临床上检测传染病和自身免疫病、过敏症等,在抗体生产领域它与ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技术相接合已成为单克隆抗体生产的主要筛选手段。
毛细管印迹法是将凝胶放在缓冲液浸湿的滤纸上,在凝胶上放一片NC膜,再在上面放一层滤纸等吸水物质并用重物压好,缓冲液就会通过毛细作用流过凝胶。缓冲液通过凝胶时会将蛋白质带到NC膜上,NC膜可以与蛋白质通过疏水作用产生不可逆的结合。
电泳印迹法是用有孔的塑料和有机玻璃板将凝胶和NC膜夹成“三明治”形状,而后浸入两个平行电极中间的缓冲液中进行电泳,选择适当的电泳方向就可以使蛋白质在电场力的作用下离开凝胶结合到NC膜上。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。
WB对照系统
阳性对照:Z好有标准品,或阳性血清、阳性上清。
阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清,测培养上清,用无克隆培养上清。
空白对照:不加一抗,用1%BSA代替。
无关对照(替代对照):用无关项目一抗,或无关项目的抗体。
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