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原代培养是个很费时间和精力的过程,希望这样可以使很多人能够少走弯路,节约时间。原代培养之贴块法经验分享:
1.要用胎牛血清（http://www.shijichina.com/goodsid/fenleier/3208872/1.html）。开始用的是小牛血清，所以总是不成功，培养基换为DMEM/F12,但后来我又换成DMEM，也培养出来了。-所以作实验特别是新手，刚开始还真得不怕花钱，否则，费时又费力。
2.把脐动脉剪开很麻烦，因为它老是打弯，三木提示可以找个软木塞，用大头针固定，后来我找了块木板，因为有磨擦力，所以动脉可以固定在板上。
3.对于新手来讲，Z麻烦的就是把组织快剪成1mm3小块，可以找块磨砂玻璃，切完再剪就好多了。
4.把剪碎的组织快移到培养瓶里，我用了类似牙科的刮匙，直接放进瓶里。加入2ml培养液，一定不能放多，防止漂浮。然后用玻璃分针轻轻将小块分离开。
其他的基本就按文献就可以了，比如，三个小时后翻瓶，换液时保留1/3。
不过，我的细胞总是到2个星期后才开始生长，快一个月了才长满瓶。刚开始长得特别慢，后来就快多了，传完代后就长得更快了。
细胞培养实验为什么要热灭HX清?
细胞培养（http://www.shijichina.com/goodsid/fenleier/3208578_xibaopeiyangfuwu/1.html）实验加热血清可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭HX清。
动物细胞培养液（http://www.lookbio.com/threestyle/lookbio/firstcatalog/3214488_xibaopeiyangye/1.html）为什么要使用动物血清?有何作用?
因为动物细胞的复制需要特殊的因子来辅助，而血清中含有这种辅助因子。
血清主要作用：
一方面提供营养:
1)提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。
2)提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素、类固醇激素等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
3)提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。
另一方面对有一定的保护作用:
1)提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。
2)对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。
因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用，如SeO3,硒等。
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