DNA产物纯化试剂盒说明书/D1300/北京索莱宝

DNA产物纯化试剂盒说明书/D1300/北京索莱宝

生产商：北京索莱宝

产品名称：DNA产物纯化试剂盒

货号：D1300

规格：50T/100T

保存：常温干燥保存，复检期为一年。

DNA产物纯化试剂盒内容：

组合液

漂洗液

洗脱液

吸附柱

收集管

说明书

DNA产物纯化试剂盒说明：

本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应液中的DNA的片段，同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp-40kb大小的DNA的片段，回收率可达80%以上（小于100bp和大于10kb的DNA的片段回收率为30-50%）。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。

DNA产物纯化试剂盒注意事项：在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。

1. 本试剂盒适用于无选择性地回收溶液中所有DNA的片段（可去除50bp以下的小片段），如需选择性地回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择琼脂糖凝胶回收试剂盒。

2. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

3. 回收小于100bp和大于10kb的DNA的片段时，可适当延长吸附和洗脱的时间。

DNA产物纯化试剂盒操作步骤: （使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。）

1、估计PCR反应液或酶切反应液的体积，向其中加入5倍体积的结合液，充分混匀。如PCR反应体系为100ul,则加入500ul结合液。

2、将上一步所得溶液加入一个吸附柱中（吸附柱放入收集管中），室温放置2分钟，12,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。注意：吸附柱大容积为800ul,若样品体积大于800ul可分批加入。

3、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12，000rpm离心30-60秒，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

4、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

5、12000rpm离心2min，尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。

6、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜ZY悬空滴加适量经65-70℃水浴预热的洗脱液，室温放置

2min，12000rpm离心2min收集DNA溶液。

注意：1、为了增加回收效率，可将得到的收集液重新加入吸附柱中，12000rpm再次离心2min。

2、洗脱缓冲液体积不应少于30ul，体积过小影响回收效率。

3、洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。

7、DNA产物-20℃保存。

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