U20S细胞
上海慧颖生物常年供应大量细胞,涉及细胞有人正常细胞,人肿瘤细胞,动物正常细胞,动物肿瘤细胞。细胞种类较多,本展台无法一一体现,有意愿购买细胞的客户请及时和销售客服咨询是否有您需要的细胞。
U20S细胞
细胞培养中常见的污染情况总结如下:
常见的污染如下:
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。
仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!
可在培养液中加相应的抗生素处理
2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,
用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。
其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。
预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作
3、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中Z常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。
用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
4、黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
6、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,Z终形成恶性循环。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等
关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。
也可以在培养基中事先加入双抗(硫酸链霉素和氨苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。
1、孵箱应定期用三氧机消毒 或者 紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水
2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素
3、超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染
4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水喷洒中和,约几小时即可进入操作。
本公司其他人肿瘤细胞如下:
K562 1640 10% 慢性髓原白血病 悬浮
H128* DMEM 10% 小细胞肺癌 悬浮,集聚
H69 DMEM 10% 小细胞肺癌 悬浮
HS77 DMEM 10% 小细胞肺癌 悬浮
A549 1640 10% 肺腺癌 上皮样
LTEP-A2 1640 10% 肺腺癌 上皮样
SPC-A1* 1640 10% 肺腺癌 上皮样
D6 1640 10% 肺腺癌 上皮样
LAX 1640 10% 肺腺癌 皮样
NCI-H460 DMEM 10% 大细胞肺癌 上皮样
95-D 1640 10% 高转移肺癌
Calu-3 DMEM 10% 肺腺癌
HCCLMS DMEM 10% 肝转移癌 上皮样
SMMC-7721* DMEM 10% 肝癌 上皮样
BEL-7402 DMEM 10% 肝癌 上皮样
BEL-7404 DMEM 10% 肝癌
BEL-7405 DMEM 10% 肝癌
QGY-7701 DMEM 10% 肝癌
QGY-7703 DMEM 10% 肝癌
QGY-Q3* DMEM 10% 肝癌 上皮样
HepG2 DMEM 10% 肝癌
Hep3B DMEM 10% 肝癌
BGC-823 DMEM 10% 低分化胃腺癌
SGC-7901* 1640 10% 胃癌 上皮样
ECA-109 DMEM 10% 食管癌
MNK-7* 1640 10% 乳癌 上皮样
SK-BR-3* 1640 10% 乳腺腺癌 上皮样
BT-474 DMEM 10%insulin(0.2U/ml) 乳癌 上皮样,呈片状
MCF-7* 1640/DMEM 10% 乳腺腺癌 上皮样
ZR-75-1 1640 10% 乳癌 上皮样
ZR-75-30 1640 10% 乳腺癌
MDA-MB-231 DMEM 10% 乳癌 Adherent,Epithelial
Bcap-37 DMEM 10% 乳腺癌
MDA-MB-435S DMEM 10% 乳腺管癌
T47D 1640 10%Insulin (0.2U/ml) 乳腺管癌
BT-20 1640 10% 乳癌
HBL-100 DMEM 10% 乳腺细胞
JEG 1640 10% 绒癌 上皮样
JAR 1640 10% 绒癌 上皮样
HeLa* 1640 10% 宫颈癌 上皮样
HeLa-229 1640 10% 宫颈癌
HO-8910 DMEM 10% 卵巢癌
C200 1640 10% 卵巢癌
HT-29* 1640 10% 结直肠癌 Adherent,epithelial
Sw620 DMEM 10% 结肠癌
LoVo 1640 10% 结肠腺癌 上皮样
Ls-174-T 1640 10% 结肠腺癌
HCT-8 1640 10% 回盲肠腺癌
HCE-8962 1640 10% 盲肠未分化癌
SHG-44 1640 10% 脑胶质瘤 上皮样
U-251 1640 10% 脑星形胶质瘤
SK-N-SH 1640 10% 脑星形胶质瘤
CNE 1640 10% 鼻咽癌
Jurkat 1640 10% 急性T细胞白血病 悬浮
Hut102 1640 10% 人皮肤T细胞淋巴瘤 悬浮
Hut-78 1640 10% 人皮肤T细胞淋巴瘤 悬浮
HL-60* 1640 10% 人原髓细胞白血病 悬浮
U937 1640 10% 组织细胞淋巴瘤
Raji 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
Namalwa 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
A431 10% F12 人表皮癌
SH-SY5Y MEM+F12(1:1)15% 人神经瘤细胞
DU145* 1640 10% 前列腺癌 Adherent,epithelial
PC-13 1640 10% 前列腺癌
CL1 1640 10% 前列腺癌
ME12 1640 10% 前列腺癌
P69 1640 10% 前列腺癌
Tca-8113 1640 10% 舌癌 上皮样
KB 1640 10% 空腔表皮样癌
Hep-2 1640 10% 喉表皮样癌
ACC-2 1640 10% 腺样囊性癌
ACC-3 1640 10% 腺样囊性癌
THP-1 1640 10% 单核细胞瘤
A375 1640 10% 恶性黑色素瘤
T-24 1640 10% 膀胱变异细胞癌
EJ 1640 10% 膀胱癌
ScaBER 1640 10% 膀胱鳞癌
PANC-1 DMEM 10% 癌
Bxpc-3 DMEM 10% 腺癌
EH-PAN1 DMEM+15%FBS 人原代癌
MG-63 DMEM 骨肉瘤 贴壁生长
U2OS DMEM 骨肉瘤 贴壁生长
HOS8603 DMEM(10%FBS) 骨肉瘤
LUXL-1 IMDM 交质瘤
LUXL-2 IMDM 交质瘤
786-O 人肾透明细胞腺癌细胞
A172 人脑胶质母细胞瘤细胞
AGS 人胃癌细胞
AZ-521 人胃癌细胞
SW480 人结肠腺癌细胞
CaCo-2 人结肠癌细胞
HGC-27 人胃癌细胞
Hs 746T 人胃癌细胞
MGC80-3 人胃癌细胞
MKN-45 人胃癌细胞
NUGC-3 人胃癌细胞
SNU-638 人胃癌细胞
SNU-739 人肝癌细胞
Tca8113 人舌鳞癌细胞
U251 人脑胶质瘤细胞
U-373MG 人脑神经胶质瘤细胞
U-87 MG 人脑星形胶质母细胞瘤
OPM-2 人瘤细胞
NCI-H929 人瘤细胞
U266 人瘤细胞
CAL 27 人舌鳞癌细胞
DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞
5637 人膀胱癌细胞
SK-OV-3 人卵巢癌细胞
GBC-SD 人胆囊癌细胞
MKN-28 人胃癌细胞
NCI-N87 人胃癌细胞
QCY-7703 人肝癌细胞
HepG2.2.15 人肝癌细胞
HuH7 人肝癌细胞
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