SPE固相萃取简介
固相萃取小柱为样品分析前的储备提供快速和有效的纯化和浓缩,为使这些产品获得Z佳的分析结果需要注意以下四个方面:
1、 样品的物理和化学特征:影响因素如被分析物相对与介质的极性,带电荷的官能团,溶解性,分子量,等等,决定了被分析物与填充床的结合强度。
2、 选择适当的保留方法:可能的方法有两种:*,被分析物不保留与填充床,而干扰物保留,如此纯化了样品。第二,被分析物保留与填充床,而干扰物不保留,或者在样品洗脱前先从填充床上洗脱。当样品需要浓缩时,常用的方法为第二种方法。
3、 选择适当的填充料和填充床大小:不同的填料类型提供不同的选择性。填料类型应Z大的利用被分析物和样品中的干扰物的结构差异。选择有适当选择性的填料能获得Z高的回收率和Z高纯度的样品和提取物。当填充床的大小未经优化时,通常有回收率低的问题。填充床太大时会导致洗脱不完全,而填充床太小时会导致保留不完全,两种情况都是回收率比预期的低。
4、 选择合适的调节,冲洗和洗脱溶剂:必须注意各类溶剂相对于填料的洗脱强度(见下图)上样的样品调节溶剂应是没有洗脱作用的“弱溶剂”,必须使用缓冲也来控制潜在的带电荷化合物的离子化程度。冲洗溶剂应将弱保留的干扰物洗脱,但是洗脱强度不应太强而导致被分析物洗脱。洗脱溶剂的强度应足够使被分析物在较小的体积下(1-2ml)完全洗脱。
化合物在溶剂中的溶解性是一个重要的参数。一种溶剂如果不溶解被分析物而溶解样品中的干扰物,那么它是一种的冲洗溶剂,但是不能作为洗脱溶剂。