内皮细胞生长因子 (ECGFpro1),血液内皮细胞的培养,BEC
产品编号:300-090-B
产品规格:6 mg
内皮细胞生长因子 (ECGFpro1),血液内皮细胞的培养,BEC
Endothelial Cell Growth Factor (ECGFpro1) for blood endothelial cells
描述: 内皮细胞生长因子(ECGF)是一种从牛大脑中提取出来的,含有能够促进哺乳动物血管内皮细胞生长的因子。制备内皮细胞生长因子的方法是根据Maciag等的方法(1979)修改过的,是从含有氯化钠和硫酸链霉素的溶液中无菌冻干而来的。ECGFpro1是重组人VEGF165(浓度:10ng/ml)的辅助添加物,这个浓度足以满足血液血管内皮细胞如血管内皮细胞(HUVEC)和人微血管内皮细胞(HMVEC)的培养。
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)可以用传统的方法进行原代培养。这些细胞的持续增殖已被证明是非常困难的。牛脑中的提取物可以保证这些细胞的长期体外增殖。在细胞培养系统中加入纤维连接蛋白或胶原基质可以培养内皮细胞。当加入ECGF后,在细胞培养液中加入胎牛血清的量可以减少。肝素可以提高ECGF有丝分裂的活性。 有报道称在培养杂交瘤和其他类型的细胞时,加入ECGF后可以不用加入饲养层细胞。
宿主: 牛 (经测试,无疯牛病!)
纯化: 粗提物
添加因子: rh-VEGF165 (终浓度: 10 ng/ml)
肝素: 2.5 mg/mg ECGF
缓冲液: H2O, w/o 防腐剂
形式: 冻干粉
使用: 加入到500ml内皮生长培养基中
使用说明:内皮细胞生长因子是经过无菌冻干的,每小瓶含6毫克蛋白。原液的配制:用2毫升预热(37℃)的灭菌平衡盐溶液溶解蛋白,温和旋转小瓶使干粉溶解。原液可进一步用无菌组织培养液稀释到所需的工作浓度。虽然原液可加入无菌组织培养液中,建议将稀释的蛋白无菌过滤后使用。ECGF + VEGF-A 足以用于500 ml 生长培养基中。
生物活性/工作浓度: 培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),ECGF适宜浓度是50-200μg/ml.加入50 μg/ml肝素后,ECGF的适宜浓度是10 μg/ml.
种属的特异性: 牛ECGF 可以作用于牛,小鼠和人的细胞。
保存条件:
溶解之前保存 2-8 °C。 溶解之后,溶液保存在 –20 °C。
推荐将溶解后溶液保存在 -20°C。避免反复冻融。
使用: 牛ECGF pro1 只用于科研,不能应用于临床!
产品编号: 300-090-B 规格: 6 mg
参考文献: [Maciag T (1982) JBC 257:5333; Olander J (1980) In Vitro 6:209; Folkman J (1980) Nature 288:551; Evans CH (1982) JNCI 68:127; Pintus C (1983) J Immuno Meth 61:195; Maciag T (1979) PNAS 6:5674; Thornton SC (1983) Science 222:623; Ransom JH (1986) Methods Enzymol 121:293]