品牌
SOLARBIO/索莱宝
货号
BC0340
规格
50管/48样
供货周期
现货
主要用途
糖代谢系列试剂盒糖原含量测试
应用领域
医疗/卫生,化学品检测,生物产业,石油/化工
糖代谢系列试剂盒糖原含量测试盒
货号:BC0340
规格:50管/48样
测试方法:可见分光光度法
产品内容:
提取液:液体50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:0.1mg/mL 的葡萄糖标准液 10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶, 4℃保存;
产品简介:
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理:蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、 糖原提取:
1﹑细胞或细菌:收集500~1000 万细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;加入0.75mL 提取液超声波破碎细菌或细胞(功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);转移至10mL 试管中,置于沸水浴中煮沸20min(盖紧,防止水分散失),隔5min 振摇试管1 次,使充分混匀;取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5ml,混匀,待测。
2﹑组织:称取0.1~0.2g 样品,置于10ml 试管中;加入0.75ml 提取液,置于沸水浴中煮沸20min(盖紧,防止水分散失),隔5min 振摇试管1 次,使充分混匀;待组织全部溶解后,取出试管冷却后,用蒸馏水定容到5ml,混匀,待测。
二、 步骤和加样表
1、 分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。
2、 调节水浴锅至95℃。
3、 试剂二工作液的配置:在试剂二中倒入10mL 蒸馏水,缓慢倒入40mL 浓硫酸,充分溶解混匀后使用。用不完的的试剂4℃有效期一周。
试剂 | 空白管(μL) | 标准管(μL) | 测定管(μL) |
糖原提取液 | | | 250 |
试剂一 | | 250 | |
蒸馏水 | 250 | | |
试剂二 | 1000 | 1000 | 1000 |
混匀,置沸水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却,于620nm 波长处,分别读取空白管、标准管和测定管吸光度,分别记为A1、A2 和A3。
注意:空白管和标准管只要测一次。
如果A3-A1 大于2,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应的稀释倍数。
三、 糖原含量的计算:
1、 按照样本质量计算
糖原(mg/g 鲜重)=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
2、 按照蛋白质含量计算
糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷Cpr
1.11:是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数,即111ug 糖原用蒽酮试剂显色相当于100ug 葡萄糖用蒽酮所试剂显示的颜色;C 标准管:标准管浓度,0.1mg/mL;V1:加入反应体系中糖原提取液体积,0.25mL;V2:加入提取液体积,5mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
相关文献:
《The role of insulin in transdifferentiated hepatocyte proliferation and function in serum‐free medium》 作者:Ce Gu, Panpan Li, Wei Liu, Yan Zhou, Wen‐Song Tan 期刊:Journal of Cellular and Molecular Medicine 影响因子:4.658 PMID:30950200
《MiR-214 inhibits snakehead vesiculovirus (SHVV) replication by targeting host GS》 作者:Chi Zhang,Ningqiu Li,Xiaozhe Fu,Qiang Lin,Li Lin,Jiagang Tu 期刊:Fish and Shellfish Immunology 影响因子:3.298 PMID:30308292
糖代谢系列试剂盒糖原含量测试盒订购说明:
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运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速GX的快递保证产品快速送达您的手中。