植物硝态氮测试盒 氮代谢
植物硝态氮测试盒说明书
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
英文名称:Plant nitrate nitrogen content detection kit
关键词:植物硝态氮|植物硝态氮检测|硝态氮
分光光度法
货号:BC1500
规格:50 管/48 样
产品说明:
试剂一:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 2mL 浓硫酸充分溶解。
试剂二:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 支,4℃保存。
产品说明:
硝态氮是植物Z主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:
一、样本处理
按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min,期间不断晃动或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min,待冷却后于 25℃,12000g 离心 15min,取上清待测。(深色植物匀浆后加入约 3mg试剂三后再提取)
二、测定操作表
空白管 测定管
样本(μL) 20
蒸馏水(μL) 20
试剂一(μL) 80 80
充分混匀,25℃静置 30min
试剂二(μL) 1900 1900
混匀,25℃静置 5min,取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿中测定 410nm处吸光值 A,△A=A 测定管-A 空白管
注意:空白管只需测定一次。
三、计算公式
标准曲线:y=0.633x-0.0397,R2=0.9997
NO3- N 含量(μg/g)=(△A+0.0397)÷ 0.633×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)= 158×(△A+0.0397)÷W
V 反总:反应总体积,2mL;
V 样:反应体系中加入样本体积,0.02mL;
V 样总:加入提取液体积,1mL,
W:样本质量,g
注意事项
1. 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。
2. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。
3. 检出限为 62.8μg/g。
相关文献:
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影响因子:3.537 PMID:30048775
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