细胞凋亡DAPI染色试剂盒 齐一现货供应

细胞凋亡DAPI染色试剂盒

产品简介

DAPI ， 即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride ， 也称DAPI dihydrochloride ， 分子式为C16H15N5 · 2HCl ，分子量为350.25 ，CAS Number 28718-90-3。DAPI是一种DNA特异性蓝色荧光染料，与双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI的Z大激发波长为340nm，Z大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，Z大激发波长为364nm，Z大发射波长为454nm。

DAPI对细胞膜有半通透性，可透过正常活细胞产生较弱的蓝色荧光（细胞固定后荧光增强），而凋亡细胞的膜通透性增加，对其摄取能力增强，产生很强蓝光染色。并且正常细胞的核形态呈圆形，边缘清晰，染色均匀，而凋亡细胞的细胞核边缘不规则，细胞核染色体浓集，着色较重，并伴有细胞核固缩，核小体碎片增加，因此从荧光强度及核形态均可鉴别出细胞发生凋亡的典型特征。
试剂盒以外自备仪器和试剂
荧光显微镜或流式细胞仪、低速离心机、微量移液器、1.5m L离心管、载玻片、盖玻片、甲醇

保存条件：

4℃保存，DAPI染液需避光保存。

注意事项：

1、   荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

2、   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作规程

1、   DAPI工作液的配制：

使用前，取试验盒中DAPI染液原液用蒸馏水稀释10～20倍，即得1-2μg/mL的DAPI工作液（4 ℃避光保存6个月）。

2、   样品的处理

a、对于细胞

※  按照常规的方法离心（2000rpm，5min）收集细胞5×105，小心吸除上清，同时确保尽量没有细胞被吸除，用500μL DAPI工作液洗涤细胞一次，离心去除上清。

※  再加入500μL的DAPI工作液重悬细胞，37℃染色15 min。

※    离心（2000rpm，5min）收集细胞，弃去染色液。

※    加入适量的溶液A重悬细胞，滴加于载玻片上。

※  然后转入第3步。

 b、对于细胞爬片或组织

※  贴壁培养的细胞爬片弃去培养基，加500μLDAPI工作液洗涤一次。

※  再滴加500μL的DAPI工作液，37℃染色15 min。

※    弃去染色液，甲醇漂洗一次。

※    滴加甘油或溶液A。

※  然后转入第3步。

3、   荧光显微镜以340/380nm紫外光激发，500×（40×12.5）（Z好是以100 ×油镜头）观察、拍照。

细胞凋亡DAPI染色试剂盒

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细胞凋亡DAPI染色试剂盒

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