Protein S 人蛋白S（Protein S）ELISA试剂盒

一、参数规格

人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒样品收集、处理

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

二、特点：
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原(或抗体)，使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置

三、使用方法

人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

   12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

   6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

   3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

   1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

四、注意事项

    1. 由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。

2. 检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。

3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。

4. 要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。

5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

五、代测服务

1. 客户以快递形式送标本，上海市内客户代测样本可享我司上门取样服务。

2. 客户的标本严格遵循标本的前处理原则。

3. 本公司人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒代测服务提供真实的机读OD值结果和照片。