新霉素检测试剂盒

新霉素检测试剂盒 

注意：在使用前请认真阅读说明书（请以英文为准，中文仅供参考）

1、概述

新霉素检测试剂盒适用于检测新霉素的含量。这个检测适用于定量或定性检测样品中新霉素残留。样品的提取步骤请与我公司。如果有必要可以通过HPLC, GC/MS或其他的传统方法证实测定结果。

2、安全说明

试剂盒中的标准溶液中含有少量的新霉素。底物中含有四甲基联苯胺。终止液也含有稀硫酸。要避免皮肤和粘膜与终止液接触。如果不小心接触了请用大量的水冲洗。

3、储存和稳定性

应该保存在2–8°C。在使用之前试剂盒中的试剂要恢复到室温。试剂盒在有效期内可以使用。结合物以低压冻干的形式保存（3瓶）。在检测前要用结合物稀释液配制一定量低压冻干形式保存的结合物。因为配制好的溶液仅能保存1周所以需要多少就配制多少。

4、原理

Abraxis的原理是直接竞争酶联免疫反应。通过特异性抗体来识别新霉素。样品中新霉素和新霉素-HRP酶结合物竞争与溶液中兔抗新霉素抗体结合位点结合。这新霉素抗体与固定在微孔板上的二抗结合。洗板，加入底物显色剂发生显色反应；样品中的新霉素浓度与显现出的蓝色的深度成反比。加入反应终止液终止反应。在450nm波长进行检测，通过做标准曲线计算每个样品中新霉素的含量。

5、的限制和可能的干扰

样品中的很多易出现的有机物和无机物已经被检测表明对试剂盒的检测没有干扰。然而由于样品中化合物的多变性引起的基质效应是不可能完全避免的。在使用的过程中出现失误也会影响结果，比如：试剂盒保存条件不对、错误的加液顺序、试剂的量没有加准确、孵育的时间太长或太短、孵育的温度太高或太低（低于10°C或高于30°C）。和其它检测方法一样对阳性结果要求通过其它传统的方法来验证。

工作指导

A 试剂盒组成

1、96孔酶标板：包被有羊抗兔二抗，1块（12条×8孔）。
2、新霉素标准品:7瓶，浓度分别为0, 0.025, 0.05, 0.125, 0.25, 0.5, 和1.0 ng/mL

3、新霉素HRP酶标记物（结合物）：3瓶（低压冻干保存），溶解后每瓶3ml

4、结合物稀释液12 mL：用于稀释新霉素HRP酶标记物

5、兔抗新霉素抗体：1瓶（6ml）

6、样品稀释液25ml，用于稀释样品。

7、5×浓缩洗液：1瓶（100ml）

8、底物显色液（TMB）：1瓶（12ml）

9、终止液：1瓶（12ml）。

B、检测准备

微量移液器和吸头是必须使用的，推荐使用排枪来添加结合物、抗体、底物和终止液，这样可以保证整个酶标板的孵育时间*。在做同一次测试时要使用同一个盒子里的试剂和标准。

1、使用前将所有的试剂拿到室温（19℃-25℃）。

2、从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。置于4-8℃保存。

3、标准液，抗体，底物，终止液不用稀释直接使用。

4、提供的结合物是以低压冷冻干燥的形式来保存的。在检测前根据用量来配制。一旦稀释只能保存1周的时间。稀释后每瓶足够50个孔使用。配制的时候需要在新霉素HRP酶标记物（结合物）瓶子中加入3ml结合物稀释液震荡混匀即可。

5、以1：5的比例稀释洗液（如果要使用一整瓶那么100ml洗液+ 400ml蒸馏水或无离子水）。

6、由于终止液中包含酸，拿的时候要小心。