一、人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒检测原理
Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二、标本要求
1. 血清:温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
三、人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格优惠,质量保证,Z大限度的节省实验经费。
四、人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒注意事项
1. 由于底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。
2. 检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。
3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。
4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
五、代测服务
客户以快递形式送标本,上海市内客户代测样本可享我司上门取样服务。
本公司Z新公布的试剂盒,可以提供代测服务。
本公司上尚未列出的试剂盒,可以代为研发和测定,费用等相关信息咨询。
六、人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)ELISA试剂盒结果计算:
在半对数坐标纸上绘制标准曲线。标准品的浓度为X轴,相应的OD值为Y轴,用四参数或对数-对数法绘制Z合适的标准曲线。浓度与OD值成反比关系,随着标准品浓度的增加,黄色强度就减少,即OD值减少样本浓度可直接从标准曲线上读取。如果样本实验前进行了稀释,则试剂盒Z后结果应乘以相应的稀释因子标准曲线为逆向S型曲线。
附:采用全自动酶标仪检测,只需检测前设置好酶标仪的相关参数,如坐标参数(线性,半对数)和计算方式参数(三次回归、四参数或双对数曲线方程),即可直接得到结果。
产品名称存放:收到货后贮存于4℃,强烈建议尽快使用配制的试剂1X缓冲液贮存于4℃,将不用的微孔板放回至密封袋内密封起来,贮存于4℃,已稀释的标准品,生物标记物,抗体和HRP贮存于4℃。