Elisa试剂盒简单介绍:
【产品名称】:人神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒
【英文名称】:Human fractalkine/neurotactin ELISA KIT
【检测种属】:人、大鼠、小鼠等动植物。
【产品用途】:被测样品定性或定量分析
【产品规格】:48T、96T
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【供 货 期】:1-3天(现货供应)
【产品性状】:液体盒装
【服务优势】:全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【样本储存】:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
人神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒操作步骤
1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);每孔再加入酶标工作液100μL;空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。
7、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
9、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。Z终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
人神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒的基本原理有这几条:
1.抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水 性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学 和酶学活性;
3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反 应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
人神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒实验中封闭
1.ELISA实验中,蔗糖本身没有封闭作用;
2.封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3.加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保护剂”的作用。
4.蔗糖溶液一般在ELISA板子经过BSA封闭后加,当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理。
人神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒的操作技术有哪些影响?
1.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
2.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
3.严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
4.加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
5.封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。