人急性早幼粒白血病细胞（悬浮）NB4细胞

细胞传代   人急性早幼粒白血病细胞（悬浮）NB4细胞

1.   试验准备：200 ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2.   弃掉培养皿中的培养基，用1 ml的PBS溶液洗涤两次。

3.  用Tip头加入1 ml Trypsin液，消化1分钟（37℃，5%CO2 ）。人急性早幼粒白血病细胞（悬浮）NB4细胞用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。

4.   加入1 ml的含血清培养基终止反应。

5.   用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。

6.  将培养液装入离心管中，1 000 rpm离心5 min。

7.   用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。

8.  将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好Z至关重要的考验。
很多人都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。
在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。。。。，后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教。称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）xy-7787R    CEP152ZX体蛋白152抗体
xy-12425R    Casein kinase 1 gamma 2酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗体
xy-8018R    CLPTM1唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体
xy-8024R    CKLFH8趋化素样因子超家族成员8抗体
xy-8020R    CKLFH1趋化素样因子超家族成员1抗体
xy-8017R    CLN6神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN6抗体
xy-12005R    CEP104甘氨酸结合蛋白抗体
xy-11719R    Calcyon多巴胺D1受体相互作用蛋白抗体
xy-11721R    CapicuaCapicua蛋白抗体
xy-7983R    CA6碳酸酐酶6抗体
xy-8631R    Connexin 29间隙连接蛋白29抗体
xy-8697R    Connexin-29间隙连接蛋白29抗体
xy-4897R    CXCR7细胞表面趋化因子受体7抗体
xy-11711R    C1orf76神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体
xy-11712R    CHMP2B染色质修饰蛋白2B抗体
xy-11713R    CKAP1细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体
xy-11714R    CLN5神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN5抗体
xy-11715R    CLN8神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN8抗体
xy-11716R    CRBNcereblon蛋白抗体
xy-11717R    CTRP5补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白5抗体
xy-11718R    CUG-BP1胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1抗体
xy-11831R    Chordin原肠胚双向形成相关蛋白抗体
xy-7781R    CDC123细胞分裂周期蛋白CDC123抗体
xy-8016R    CLN3神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体
xy-8021R    CKLFH3趋化素样因子超家族成员3抗体
xy-7789R    CHMP1B染色质修饰蛋白1B抗体
xy-7790R    CIRBP冷诱导RNA结合蛋白抗体
xy-7792R    CLASP1细胞连接相关蛋白1抗体
xy-7793R    CLASP2细胞连接相关蛋白2抗体
xy-6411R    phospho-CDK5(Tyr15)磷酸化周期素依赖性激酶5抗体
xy-8019R    ICMT异戊烯半胱氨酸羧基甲基转移酶抗体
xy-8015R    CLLD7鸟嘌呤核苷酸交换因子CLLD7抗体
xy-8022R    CKLFH4趋化素样因子超家族成员4抗体