人结肠腺癌细胞,HCT-8细胞

细胞传代   人结肠腺癌细胞,HCT-8细胞

1.   试验准备：200 ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2.   弃掉培养皿中的培养基，用1 ml的PBS溶液洗涤两次。

3.  用Tip头加入1 ml Trypsin液，消化1分钟（37℃，5%CO2 ）。人结肠腺癌细胞,HCT-8细胞用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。

4.   加入1 ml的含血清培养基终止反应。

5.   用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。

6.  将培养液装入离心管中，1 000 rpm离心5 min。

7.   用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。

8.  将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好Z至关重要的考验。
很多人都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。
在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。。。。，后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教。称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）XY1848    hCSF1R-ELISA    人CSF1R/M-CSFRELISA试剂盒     Human CSF1R/M-CSFR ELISA Kit    96 tests    
XY1849    hKal3-ELISA    人Kallikrein 3ELISA试剂盒    Human Kallikrein 3 ELISA Kit    96 tests    
XY1850    hRANK-ELISA    人 Receptor Activator of NF-κB (RANK)ELISA试剂盒    Human Receptor Activator of NF-κB (RANK) ELISA Kit    96 tests    
XY1851    hMPO-ELISA    人过氧化物酶ELISA试剂盒    Human Myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit    96 tests    
XY1852    hPAI1-ELISA    人PAI-1ELISA试剂盒    Human PAI-1 ELISA Kit    96 tests    
XY1853    hDKK1-ELISA    人DKK-1ELISA试剂盒    Human DKK-1 ELISA Kit    96 tests    
XY1854    hPECAM-ELISA    人PECAM-1/CD31ELISA试剂盒    Human PECAM-1/CD31 ELISA Kit    96 tests    
XY1855    hBMP7-ELISA    人BMP-7ELISA试剂盒    Human BMP-7 ELISA Kit    96 tests    
XY1856    hp53-ELISA    人p53 ELISA试剂盒    Human p53 ELISA Kit    96 tests    
XY1857    hCEA-ELISA    人CEAELISA试剂盒    Human CEA ELISA Kit    96 tests    
XY1858    hTLR2-ELISA    人TLR2ELISA试剂盒    Human TLR2 ELISA Kit    96 tests    
XY1859    hTLR3-ELISA    人TLR3ELISA试剂盒    Human TLR3 ELISA Kit    96 tests    
XY1860    hTF/F3-ELISA    人组织因子/F3ELISA试剂盒    Human Tissue factor/F3 ELISA Kit    96 tests    
XY1861                    
XY1862                    
XY1863    mBDNF-ELISA    小鼠脑源性神经生长因子ELISA试剂盒    Mouse BDNF ELISA Kit    96 tests    
XY1864    mBMP-2-ELISA    小鼠BMP-2ELISA试剂盒    Mouse BMP-2 ELISA Kit    96 tests    
XY1865    mEGF-ELISA    小鼠表皮生长因子ELISA试剂盒    Mouse EGF ELISA Kit    96 tests    
XY1866    mEPO-ELISA    小鼠促红细胞生成素ELISA试剂盒    Mouse EPO ELISA Kit    96 tests    
XY1867    mFAS-ELISA    小鼠凋亡相关因子ELISA试剂盒    Mouse FAS ELISA Kit    96 tests    
XY1868    mFN-ELISA    小鼠胚胎纤维连接蛋白ELISA试剂盒    Mouse Fibronectin ELISA Kit    96 tests    
XY1869    mG-CSF-ELISA    小鼠粒细胞集落刺激因子ELISA试剂盒    Mouse G-CSF ELISA Kit    96 tests    
XY1870    mGM-CSF-ELISA    小鼠粒细胞巨噬细胞刺激因子ELISA试剂盒    Mouse GM-CSF ELISA Kit    96 tests    
XY1871    mICAM-1-ELISA    小鼠细胞间粘附分子ELISA试剂盒    Mouse ICAM-1 ELISA Kit    96 tests    
XY1872    mIFN-γ-ELISA    小鼠IFN-γELISA试剂盒    Mouse IFN-γ ELISA Kit    96 tests    
XY1873    mIGF-1-ELISA    小鼠IGF-1ELISA试剂盒    Mouse IGF-1 ELISA Kit    96 tests    
XY1874    mIGF-2-ELISA    小鼠IGF-2 ELISA试剂盒    Mouse IGF-2 ELISA Kit    96 tests    
XY1875    mIGFBP-1-ELISA    小鼠IGFBP-1ELISA试剂盒    Mouse IGFBP-1 ELISA Kit    96 tests    
XY1876    mIGFBP-3-ELISA    小鼠IGFBP-3ELISA试剂盒    Mouse IGFBP-3 ELISA Kit    96 tests    
XY1877    mIL-1α-ELISA    小鼠IL-1αELISA试剂盒    Mouse IL-1α ELISA Kit    96 tests    
XY1878    mIL-1α-ELISA    小鼠IL-1αELISA试剂盒    Mouse IL-1α ELISA Kit    96 tests    
XY1879    mIL-2-ELISA    小鼠IL-2ELISA试剂盒    Mouse IL-2 ELISA Kit    96 tests    
XY1880    m IL-3 -ELISA    小鼠IL-3ELISA试剂盒    Mouse IL-3 ELISA Kit    96 tests    
XY1881    m IL-4-ELISA    小鼠IL-4 ELISA试剂盒    Mouse IL-4 ELISA Kit    96 tests    
XY1882    m IL-5-ELISA    小鼠IL-5ELISA试剂盒    Mouse IL-5 ELISA Kit    96 tests    
XY1883    m IL-6-ELISA    小鼠IL-6ELISA试剂盒    Mouse IL-6 ELISA Kit    96 tests