人口腔上皮癌长春新碱耐药株 KB/V细胞

细胞传代   人口腔上皮癌长春新碱耐药株 KB/V细胞

1.   试验准备：200 ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2.   弃掉培养皿中的培养基，用1 ml的PBS溶液洗涤两次。

3.  用Tip头加入1 ml Trypsin液，消化1分钟（37℃，5%CO2 ）。人口腔上皮癌长春新碱耐药株 KB/V细胞用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。

4.   加入1 ml的含血清培养基终止反应。

5.   用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。

6.  将培养液装入离心管中，1 000 rpm离心5 min。

7.   用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。

8.  将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好Z至关重要的考验。
很多人都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。
在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。。。。，后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教。称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）XY-axbz-071    大鼠肝星形细胞    CFSC-2G    规格25毫升/株.
XY-axbz-072    大鼠肝星形细胞    CFSC-3H & 5H    规格25毫升/株.
编号    中文    英文名称    规格25毫升/株.
XY-axbz-073    大鼠肝上皮样干细胞    WB-F344    规格25毫升/株.
XY-axbz-074    鼠肌原细胞    C2C12    规格25毫升/株.
XYaxbz-075    大鼠肺上皮Ⅱ型细胞    RLE-6TN    规格25毫升/株.
XY-axbz-076    小鼠肺成纤维细胞    L929    规格25毫升/株.
XY-axbz-077    大鼠胸主动脉平滑肌细胞，ATCC：A10    VSMC    规格25毫升/株.
XY-axbz-078    小鼠胚成纤维包装细胞    PA317    规格25毫升/株.
XY-axbz-079    小鼠胚成纤维包装细胞    ψ2    规格25毫升/株.
XY-axbz-080    叙利亚仓鼠肾细胞    BHK-21    规格25毫升/株.
XY-axbz-081        BHK    规格25毫升/株.
XY-axbz-082    转S9基因仓鼠卵巢细胞    ZA1    规格25毫升/株.
XY-axbz-083    转S9基因仓鼠卵巢细胞    ZA6    规格25毫升/株.
XY-axbz-084    大鼠巨噬细胞    MC    规格25毫升/株.
XY-axbz-085    非洲绿猴肾细胞    COS-1    规格25毫升/株.
XY-axbz-086    非洲绿猴肾细胞    COS-6    规格25毫升/株.
XY-axbz-087    猴肾细胞系    BSC-1    规格25毫升/株.
XY-axbz-088    小鼠肾小球系膜细胞    MES-13    规格25毫升/株.
XY-axbz-089    小鼠肾系膜细胞    MC53    规格25毫升/株.
XY-axbz-090    大鼠肾成纤微细胞    NRK-49F    规格25毫升/株.
XY-axbz-091    小鼠皮肤细胞    JB6-C30    规格25毫升/株.
XY-axbz-092    小鼠皮肤细胞    JB6-C41    规格25毫升/株.
XY-axbz-093    小鼠前成骨细胞    MC-3T3    规格25毫升/株.
XY-axbz-094    小鼠成骨细胞系    MC3T3-E1    规格25毫升/株.
XY-axbz-095    鼠胚成骨细胞    3T3-E1    规格25毫升/株.
XY-axbz-096    大鼠肾小管上皮细胞，ATCC：CRL-6509    NRK    规格25毫升/株.
XY-axbz-097    大鼠肾细胞    NRK-52E    规格25毫升/株.
XY-axbz-098    小鼠饲养层上皮细胞    HPT-8    规格25毫升/株.
XY-axbz-099        LLC:Leuwis肺癌细胞    规格25毫升/株.
XY-axbz-100    化学转化小鼠鼻咽上皮细胞    TMNE    规格25毫升/株.
XY-axbz-101    大鼠鼻咽癌细胞    FAT    规格25毫升/株.
XY-axbz-102    小鼠大肠癌细胞    CT-26.WT    规格25毫升/株.
XY-axbz-103    小鼠结肠癌细胞    CMT93    规格25毫升/株.
XY-axbz-104    大鼠埀体瘤细胞    GH3    规格25毫升/株.