细胞传代 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD6细胞
1. 试验准备:200 ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。
2. 弃掉培养皿中的培养基,用1 ml的PBS溶液洗涤两次。
3. 用Tip头加入1 ml Trypsin液,消化1分钟(37℃,5%CO2 )。人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD6细胞用手轻拍培养瓶壁,观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。
4. 加入1 ml的含血清培养基终止反应。
5. 用Tip头多次吹吸,使细胞完全分散开。
6. 将培养液装入离心管中,1 000 rpm离心5 min。
7. 用培养液重悬细胞,细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。
8. 将合适体积完全培养液加入离心管中,混匀细胞后轻轻加入培养皿中,使其均匀分布。
传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。
很多人都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。
在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。。。。,后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教。称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例)XY-hxbz-316 人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞) HeLa229 规格25毫升/株.
XY-hxbz-317 人宫颈癌细胞 Hela P10s-11F 规格25毫升/株.
XY-hxbz-318 人宫颈癌细胞 HeLa-S3 规格25毫升/株.
XY-hxbz-319 人宫颈癌细胞 SiHa 规格25毫升/株.
XY-hxbz-320 宫颈癌细胞 HCE1 规格25毫升/株.
XY-hxbz-321 人宫颈癌细胞 CaSKi 规格25毫升/株.
XY-hxbz-322 人子宫内膜癌细胞 RL95-2 规格25毫升/株.
XY-hxbz-323 人子宫鳞癌细胞(高分化) HCC 94 规格25毫升/株.
XY-hxbz-324 人子宫颈癌细胞 C-33A 规格25毫升/株.
XY-hxbz-325 人前列腺癌细胞 PC-3 规格25毫升/株.
XY-hxbz-326 人前列腺癌细胞 PC-3M 规格25毫升/株.
XY-hxbz-327 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 1E8 规格25毫升/株.
XY-hxbz-328 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 2B4 规格25毫升/株.
XY-hxbz-329 人前列腺癌细胞 DU-145 规格25毫升/株.
XY-hxbz-330 人前列腺癌细胞 UI-1 规格25毫升/株.
XY-hxbz-331 人前列腺癌细胞 22RV1 规格25毫升/株.
XY-hxbz-332 前列腺癌细胞 LncaP 规格25毫升/株.
XY-hxbz-333 非雄激素依赖型前列腺癌 Tsu-Prl 规格25毫升/株.
XY-hxbz-334 人胎盘绒毛癌细胞 JAR 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 规格25毫升/株.
XY-hxbz-335 人绒癌细胞 JEG-3 规格25毫升/株.
XY-hxbz-336 人绒毛膜癌 JEG 规格25毫升/株.
XY-hxbz-337 人胎盘绒膜癌细胞 BeWo 规格25毫升/株.
XY-hxbz-338 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16 规格25毫升/株.
XY-hxbz-339 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3/VP16-IL-2 规格25毫升/株.
XY-hxbz-340 TNFa转染耐VP16绒癌细胞 JEG-3-VP16-TNFa 规格25毫升/株.
XY-hxbz-341 人前列腺癌细胞 ALVA 规格25毫升/株.
XY-hxbz-342 人前列腺癌细胞 gpc-1 规格25毫升/株.
XY-hxbz-343 人前列腺癌细胞 9L-B 规格25毫升/株.
XY-hxbz-344 人前列腺癌细胞 9L-E 规格25毫升/株.
XY-hxbz-345 人前列腺癌细胞 JCA-1 规格25毫升/株.
XY-hxbz-346 人前列腺癌细胞 VLcop 规格25毫升/株.
XY-hxbz-347 人前列腺上皮细胞 RWPE1 规格25毫升/株.