传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到人脑胶质细胞株(正常)HEB细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤人脑胶质细胞株(正常)HEB细胞,不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
传代 ,复苏,冻存,
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
3. 离心, 1 000 rpm,5 min。
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以Z大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。xy-2932R Clathrin heavy chain网格蛋白重链抗体
xy-3845R CD168透明质酸介导细胞游走受体抗体
xy-9804R C2orf242号染色体开放阅读框24抗体
xy-9809R C2orf602号染色体开放阅读框60抗体
xy-5248R phospho-CDK7 (Thr170)磷酸化周期素依赖性激酶7抗体
xy-5249R Phospho-CDK9 (Thr29)磷酸化周期素依赖性激酶9抗体
xy-5250R phospho-CHEK1 (Ser280)磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
xy-5251R phospho-CHEK1(Ser317)磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
xy-5253R phospho-CDKN2A (Ser140)磷酸化抑癌基因p16抗体
xy-5254R phospho-CDKN2A (Ser152)磷酸化抑癌基因p16抗体
xy-5255R phospho-CDKN2A (Ser8)磷酸化抑癌基因p16抗体
xy-5256R phospho-CREB-1(Ser129)磷酸化CREB-1抗体
xy-5252R phospho-CSF2RB (Tyr766)磷酸化粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体
xy-5263R phospho-CDH2 (Tyr820)磷酸化N-钙粘附分子抗体
xy-5268R phospho-CDC27 (Thr244)磷酸化后期促进复合蛋白3抗体
xy-5184R phospho-c-Abl(Tyr283)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
xy-5183R phospho-c-Abl(Thr735)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
xy-15341R C9orf759号染色体开放阅读框75抗体
xy-0647R CD4CD4抗体
xy-2347R CD42b血小板糖蛋白GPIb抗体
xy-4098R CARM1蛋白精氨酸N甲基4抗体
xy-5285R phospho-CARM1(Ser228)磷酸化蛋白精氨酸N甲基4抗体
xy-5286R phospho-CDK6 (Tyr13)磷酸化周期素依赖性激酶6抗体
xy-4072R phospho-CBL2 (Tyr700)磷酸化原癌基因CBL2抗体
xy-5148R Cdc7细胞分裂周期蛋白7抗体
xy-5242R Phospho-cdc2 (Ser124)磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
xy-4094R Cdc25B细胞分裂周期蛋白25B抗体
xy-5284R phospho-CD244(Tyr271)磷酸化CD244抗体
xy-12059R CACNG3神经元电压门控钙通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗体
xy-15170R C3orf253号染色体开放阅读框25抗体
xy-5978R c-Myb转录激活因子MYB抗体
xy-2986R CATSPER阳离子通道精子相关蛋白1抗体
xy-13802R C1orf2221号染色体开放阅读框222抗体