传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到人胚胎肠粘膜细胞,CCC-HIE-2细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤人胚胎肠粘膜细胞,CCC-HIE-2细胞,不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
传代 ,复苏,冻存,
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
3. 离心, 1 000 rpm,5 min。
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以Z大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。xy-11804R ARFGEF2二磷酸腺苷核糖基化因子鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体
xy-11805R ATBF1α增强子结合蛋白1抗体
xy-11806R ATXN10脊髓小脑共济失调10抗体
xy-11999R AKAP7蛋白激酶A锚定蛋白7抗体
xy-11906R ABCA12腺苷三磷酸结合盒转运体12抗体
xy-11907R ABCB9腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体
xy-11908R ABCD4三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体
xy-11909R ABLIM3肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体
xy-11910R ACBD3高尔基复合体相关蛋白1抗体
xy-11912R ACACA乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体
xy-9567R ANT1+ANT2+ANT3+ANT4腺嘌呤核苷酸转运蛋白1、2、3、4抗体
xy-4977R ADAM12去整合素样金属蛋白酶12
xy-3039R Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体
xy-4969R AX2R膜粘连蛋白2受体抗体
xy-4999R AGER晚期糖基化终末产物特异性受体抗体
xy-8012R ADCKDCK5蛋白抗体
xy-8072R AGFG1艾滋病病毒复制结合蛋白抗体
xy-10083R AFP4bAFP4b蛋白抗体
xy-8073R AGFG2HIV-1病毒复制结合蛋白2抗体
xy-8071R CABC1伴侣蛋白bc1同源复合体抗体
xy-8074R ANKRD1心肌锚蛋白重复结构域1抗体
xy-8075R ARRDC1YZ蛋白结构域蛋白1抗体
xy-8076R ARRDC2YZ蛋白结构域蛋白2抗体
xy-8077R ARRDC3YZ蛋白结构域蛋白3抗体
xy-8078R ARRDC4YZ蛋白结构域蛋白4抗体
xym-4533M alpha Estradiol雌二醇抗体
xy-8462R APLP2淀粉样蛋白β前体样蛋白2抗体
xy-8465R APLP1淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体
xy-9434R APC70转录激活蛋白crsp70抗体
xy-8594R ACTBL1卵巢、胎盘、前列腺、睾丸蛋白22抗体
xy-9397R ANKRD33B锚蛋白重复结构域蛋白33B抗体
xy-4741R APOC3载脂蛋白C3抗体
xy-7604R Apoptosis enhancing nuclease细胞凋亡增强核酸酶抗体
xy-7656R ATAD5染色体脆弱性相关基因抗体