传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到人原巨核细胞型白血病细胞,UT-7细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤人原巨核细胞型白血病细胞,UT-7细胞,不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
传代 ,复苏,冻存,
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀。
3. 离心, 1 000 rpm,5 min。
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以Z大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。xy-5232R phospho-B-Raf (Ser446)磷酸化B-Raf抗体
xy-5233R phospho-B-Raf (Thr597)磷酸化B-Raf抗体
xy-5234R phospho-Bcl-xL (Thr115)磷酸化Bcl-xL蛋白抗体
xy-7698R BTG3高表达神经上皮蛋白BTG3抗体
xy-7699R BTG4B细胞迁移基因4抗体
xy-7071R BCL2 interacting proteinBCL2相互作用蛋白质抗体
xy-10077R Brain2大脑蛋白2抗体
xy-7463R BATFB细胞转录激活因子抗体
xy-13606R BCL6BBCL6B抗体
xy-6648R BAP31BAP31蛋白抗体
xy-6589R BCAT2支链氨基酸转氨酶2抗体
xy-6590R Bcl2A1BCL2相关蛋白A1抗体
xy-6591R Bcl3B细胞淋巴瘤蛋白3抗体
xy-5960R B MyB转录因子MYB相关蛋白B抗体
xy-2165R beta Defensin 1防御素β1/Defensin β1抗体
xy-2472R BAFFRB细胞活化因子受体抗体
xy-2431R BAFFTNF家族B细胞激活因子抗体
xy-0912R Batroxobin蛇毒巴曲酶抗体
xy-8508R Brn-2大脑蛋白2抗体
xy-1103R CD274程序性死亡配体1抗体
xy-0673R B7H4B7-H4抗体
xy-0164R BACE1β分泌酶抗体
xy-0892R Bad相关死亡促进因子Bad抗体
xy-0127M BaxBax
xy-1868R B7-DC程序性死亡配体2抗体
xy-1954R BSEP胆汁酸盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体
xym-0390M Beta-2-MG(B2E5)β2微球蛋白抗体(单抗)
xy-7552R Biglycan骨/软骨蛋白多糖1抗体
xy-9759R CAP染色体相关蛋白CAP抗体
xy-9269R BECN1L1Bcl-2同源结构域样蛋白1抗体
xy-7657R BAG6Bcl2相关抗凋亡基因6抗体
xy-9728R B4GALT7半乳糖转移酶7亚基β1,4抗体