Bcl-2 单克隆抗体,Bcl-2 单克隆抗体厂家
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基质金属蛋白酶-11 IHC Human
基质金属蛋白酶-12 IHC Human
基质金属蛋白酶-2 IHC Human
基质金属蛋白酶-21 IHC Human
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基质金属蛋白酶-8 IHC Human
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甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体 IHC Human
甲状腺球蛋白(TG) IHC Human , Mouse , Rat
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间变型淋巴瘤激酶磷酸化抗体 IHC Human
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胶质纤维酸性蛋白 IHC Human
胶质纤维酸性蛋白(GFAP) IHC Human , Rat
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Bcl-2 单克隆抗体 IHC Human
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免疫组化( LP 法)操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行
2. 缓冲液洗 3min/2 次。
3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。
4. 缓冲液洗 5min/2 次。
5. 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。
(注:孵育不要超过 10 分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 - 10% 正常羊血清,这一步可以省略。)
6. 缓冲液洗 5min/2 次
7. 滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 - 2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者Z终决定)
8. 缓冲液洗 5min/2 次。
9 . 滴加 Primary Antibody Enhancer( 增强子 ) , 在室温下孵育 20 分钟。
10 .缓冲液洗 5min/2 次。
11 .滴加 HRP Polymer( 酶标二抗 ) ,在室温下孵育 30 分钟。 (注: HRP Polymer 对光敏感,应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。)
12 .缓冲液洗 5min/2 次。
13 .向 1ml DAB Plus Substrate ( 或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen (或 AEC Plus Chromogen ) , 混匀后滴加到切片上,孵育 3 - 15 分钟。(具体时间由染色深浅决定。)
14 .自来水充分冲洗 , 复染,脱水 , 透明 , 封片