西尼罗河病毒(West Nile virus,WNV)是一种不分节段的单股正链RNA病毒,属于黄病毒科黄病毒属,可引起人畜共患疾病。该病毒早发现于乌干达,由于在西尼罗河地区分离得到,故而得名[1]。该病毒的主要传染源为野生鸟类,传播媒介为库蚊。病毒在鸟类体内高浓度循环,产生病毒血症 目的:建立特异、敏感、快速检测西尼罗河病毒(WNV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法。方法:针对西尼罗河病毒囊膜蛋白(E)的保守序列设计引物,建立WNV的实时荧光定量检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性以及稳定性。对保存的54例WNV感染者的血清样本进行检测,分析其检测的准确性。结果:建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法对WNV的检测具有高度的特异性,而对日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)等均无交叉反应,检测的灵敏度可达到100pg。标准曲线具有较好的线性关系,相关系数为0.995,实时荧光定量PCR效率为。对54例WNV感染样本进行检测,准确率高达98.15%。结论:实时荧光定量PCR技术检测WNV具有较高的特异性、敏感性和稳定性,可作为科研研究。