人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株
产品简介:素尔生物供应人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株,提供
的价格、特性以及技术咨询。
一、细胞背景:
生长方式:贴壁
种属:Homo sapiens 人
二、培养条件:
培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%SCL胎牛血清(货号:S20100A)+ 1%双抗+800ng/ml Taxol
温度:37.0°C
气体:空气 95%,CO2 5%
三、客户自备试剂
PBS
RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol。
0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
四、培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1,弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2,向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3,加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4,传代比例:1:2-1:3
注:培养瓶里面的培养液是加入Z高药物浓度的,为800ng/ml。我们采取缓慢增加药物的梯度的方法。具体步骤是,首先加含200ng/mlTaxol药物的培养液,放入培养箱,这段时间会有小部分细胞悬浮起来,属于正常情况,通过换液可以去掉,等细胞待长满就可以消化传代了,这时可以一直用含药物培养液来消化培养细胞,一两代之后就可以将药物浓度提高到500ng/ml,两代后可以将药物浓度提高至Z高水平800ng/ml,含药物培养液用于细胞培养都没有问题,冻存的时候就不要在冻存液里加药物了。
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