盖勃乳脂计
巴布科克法和盖勃法
1. 原理:用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质等非脂成分,将牛乳中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白,使脂肪球膜被破坏,脂肪游离出来,再利用加热离心,使脂肪完全迅速分离,直接读取脂肪层的数值,便可知被测乳的含脂率。
这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法,适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的乳品(如甜炼乳、加糖乳粉等),采用此方法时糖易焦化,使结果误差较大,故不适宜。此法操作简便,迅速。对大多数样品来说测定精度可满足要求,但不如重量法准确。
2. 试剂
(1)硫酸:相对密度1.816±0.003)(20℃),相当于91-91%硫酸。
(2)异戊醇:相对密度0.811±0.002)(20℃),沸程128-132℃。
3. 仪器
(1)巴布科克低乳脂瓶:颈部刻度有0.0-8.0%,0.0-10.0%两种,Z小刻度值为0.1%,如图。
(2)盖勃氏乳脂计 颈部刻度为0.0-8.0%,Z小刻度为0.1%,如图。
(3)乳脂离心机
(4)盖勃氏离心机
(5)标准移乳管(17.6ml,11ml)
4. 测定方法
(1)巴布科克法
①吸取17.6ml均匀鲜乳,注入巴布科克氏乳脂瓶中,再量取17.5ml硫酸,沿瓶颈壁缓缓注入瓶中,将瓶颈回旋,使液体充分混合,至无凝块并呈均匀的棕色;②置乳脂离心机上,以约1000r/min的速度离心5min,取出加入80℃以上的水至脂肪浮到2或3刻度处,再置离心机中离心1min;③取出后置55-60℃水浴中,5min后立即读取脂肪层Z高与Z低点所占的格数,即为样品含脂肪的百分率。
(2)盖勃法 图7 巴布科克氏乳脂瓶
①在乳脂计中先加入10ml硫酸(颈口勿沾湿硫酸),再沿管壁小心
地加入混匀的牛乳11ml,使样品和硫酸不要混合,然后加1ml异戊醇,塞上橡皮塞,用布把瓶口包裹住(以防振摇时酸液冲出溅蚀衣着),使瓶口向外向下,用力振摇使凝块完全溶解,呈均匀棕色液体;②静置数分钟后瓶口向下,置于65-70℃水浴中放5min,取出擦干,调节橡皮塞使脂肪柱在乳脂计的刻度内;③放入离心机中,以800-1000r/min的转速离心5min,取出乳脂计,再置65-70℃水浴中(注意水浴水面应高于乳脂计脂肪层),5min后取出立即读数,脂肪层上下弯月形下缘数字之差,即为脂肪的重量百分数。
5. 说明 图8 盖勃氏乳脂计
(1)硫酸的浓度要严格遵守规定的要求,如过浓会使乳炭化成黑色溶液而影响读数;过稀而不能使酪蛋白完全溶解,会使测定值偏低或使脂肪层浑浊。
(2)硫酸除可破坏球膜,使脂肪游离出来外,还可增加液体相对密度,使脂肪容易浮出。
(3)盖勃法中所用异戊醇的作用是促使脂肪析出,并能降低脂肪球的表面张力,以利于形成连续的脂肪层。
(4)1ml异戊醇应能完全溶于酸中,但由于质量不纯,可能有部分析出掺入到油层,而使结果偏高。因此在使用未知规格的异戊醇之前,应先何做试验,其方法如下:
将硫酸、水(代替牛乳)及异戊醇按测定样品时的数量注入乳脂计中,振摇后静置24小时澄清,如在乳脂计的上部狭长部分无油层析出,认为适用,否则表明异戊醇质量不佳,不能采用。
(5)加热(65-70℃水浴中)和离心的目的是促使脂肪离析。
(6)巴布科克法中采用17.6ml标准吸管取样,实际上注入巴氏瓶中的样品只有17.5ml,牛乳的相对密度为 1.03,故样品重量为17.5×1.03=18g。巴氏瓶颈的刻度(0-10%)共10个大格,每大格容积为0.2ml,在60℃左右,脂肪的平均相对密度为0.9,故当整个刻度部分充满脂肪时,其脂肪重量为1.2×10×1.9=1.8g。18g样品中含有1.8 g脂肪,即瓶颈全部刻度表示为脂肪含量10%,每一大格代表1%的脂肪,故瓶颈刻度读数即为样品中脂肪百分含量。
(7)盖勃法所用移乳管为11ml,实际注入的样品为10.9ml,样品的重量为11.25g,乳脂计刻度部分(0-8%)的容积为1ml,当充满脂肪时,脂肪的重量为0.9g,11.25g样品中含有0.9g脂肪,故全部刻度表示为脂肪含量0.9/11.25×100=8%,刻度数即为脂肪百分含量。