产品名称:Human InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA
规格:原装/96T ELISA试剂盒 分装 48T/96T ELISA试剂盒
实验原理:以人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)为例
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)水平。用纯化的人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89),再与HRP标记的免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)浓度。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
试剂盒组成:
1 | 20倍浓缩洗涤液 | 30ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(180 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 中英文双版说明书 | 1份 |
5 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂A液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |