北京百瑞涛供应内毒素检测---LAL （Limulus amebocy...

1956年，Bang 在研究鲎鱼（Limulus polyphemus，俗称马蹄蟹）的一种格兰氏阴性细菌性疾病时，发现该疾病会造成鲎鱼血液凝集。进一步的研究则说明这种血液凝集现像是一连串的酵素反应，这些酵素是存在鲎鱼的阿米巴细胞中（amebocytes），而诱导凝集的因子则是细菌细胞壁中的脂多醣（lipopolysaccharide，LPS，或称内毒素，endotoxin，亦是主要热源（pyrogen））。据此，发展出制造 LAL（Limulus amebocyte lysate）的方法及测试内毒素的Z早方法－凝胶法。

※ 凝胶法操作

1. 取适当稀释的标准内毒素或样品 100μl + LAL试剂100μl

2. 于37±0.5℃非循环式水浴槽培育60±1分钟

3. 判定结果：内容物呈凝胶状则为凝集。内容物呈凝胶状但下滑，或呈浓稠状、维持液态，则为不凝集

【注意事项】
1. 本品为体外试验试剂，严禁用于人体。
2. 本品用于药品的细菌内毒素检查时，应遵循药典细菌内毒素检查法的规定。
3. 使用安瓿包装的鲎试剂在开启时，应防止玻璃屑落入瓶内，开启安瓿后应马上使用。
【规格】(1)0.2 ml (2)2 ml；1 (3)2.2 ml (4)5 ml；(5)5.2ml

【灵敏度】(1)0.03 Eu/ml； (2)0.06 Eu/ml (3)0.125 Eu/ml； (4)0.25 Eu/ml； (5)0.5 Eu/ml； (6)1.0 Eu/ml。
【贮藏】 遮光，在冷处保存。
【包装】 (1)0.2 ml小管； (2)2 ml安瓿；1 (3)2.2 ml安瓿 (4)5 ml安瓿；(5)5.2ml安瓿    (6)10支小管/盒； (7)10安瓿/盒；

※浊度法

浊度法：当有内素素存在的情况下， LAL 在形成凝胶前会先产生混浊，当内毒素含量愈高时，混浊愈快形成，混浊度可以由反应后读取 OD 360 测知，并据此对样品中的内毒素进行定量。理论上，浊度法可以有两种定量方法：(1) 终点法  (2) 动力学法

※呈色法

呈色法是Z新开发的 LAL 内毒素检测方法。它仍以 LAL-endotoxin 反应为基础，但在反应的Z后加入无色的人工多肽基质，当此基质 p-nitroaniline（pNA）被酵素裂解时呈现黄色，并吸收 405nm 的光。因此，呈色法和浊度法相似，以测量不同浓度的标准品及样品在反应后的 OD. 值，来定量样品中的内毒素含量；也同样有终点法及动力学法两种测量方式。

在终点法的使用上，若样品也会在 405 nm 吸光而造成干扰时，可在反应中加入溶有 nitrite 的 HCl 及 NEDA（N-(1-Naphthyl)-ethylenediamine），则形成 diazo 的洋红色衍生物，在 540-550nm 吸光。