细胞代谢主要是指细胞从环境中摄取营养物质,消化吸收后排放出降解物或杂质。大多数碳水化合物,例如葡萄糖,都是细胞的营养物质。在有氧条件下,葡萄糖被细胞摄取后在胞浆内转变成丙酮酸,然后进入三羧酸循环代谢,Z终变成二氧化碳并产生能量;在缺氧条件下,葡萄糖在细胞内代谢为乳酸以提供能量。总体而言,细胞代谢增强时,葡萄糖的消耗增加,酸性的代谢产物也相应增加;反之亦然。另外,外界环境因素对贴壁细胞的作用经常影响到细胞的粘附和融合度,而细胞的粘附状态是与细胞骨架的组织性和膜的完整性相关的,如果受到环境因素干扰,细胞则会改变其粘附方式,可能变圆或完全脱离基底。因此,我们监测这些参数就能很好的了解细胞内的生理状态和代谢行为。 德国cellasys公司和Hp-med公司推出的多款细胞代谢监测仪,包括高灵敏度的IMOLA-IVd系统和高通量版IMR系统,均使用非标记非侵入式测量技术,实时在线记录细胞生理学参数,包括pH值的变化率,氧气的消耗率和细胞贴壁电阻,独有的换液系统使得细胞培养环境始终保持新鲜,能够连续观察十几天,并监测再生效应。 在医学、环境监测、基础研究、以及动物学等生领域有着广泛的应用,包括:细胞学基础研究、细胞代谢生理学研究、细胞培养条件的优化、再生医学、细胞毒性检测、药物检测、临床前药物研发、环境因素(食物和水质检测)、动物学的研究等等。 德国cellasys公司和Hp-med公司的代谢测量芯片安装于生物模块之内,每个IMOLA-IVd系统/IMR系统分析系统含有6个生物模块,可以平行地操控6个芯片。生物模块在一个可调的控温孵箱中(标准温度为37°C)。自动加样器控制6个支架,每个支架带有6个储液器,每个支架的储液池针对一个生物模块。IMR系统是嵌合到一个24-well或者96-well的生物模块之中,可以一次测量24或96个样品的多个参数,同时,客户可以配置机器人手臂来进行高通量全自动化的操作,此外IMR系统IMOLA-IVd系统/IMR系统提供的专业性分析控制软件控制整个实验并且在电脑显示屏上实时在线显示具体的数据,所以实验者可以随时观察实验进程并及时做出记录和分析。 悬浮细胞的监测: IMOLA-IVd系统/IMR系统技术也可以用于监测悬浮细胞pH值的变化和氧气的消耗,将悬浮细胞培养于琼脂糖之中然后覆盖一层滤膜用于阻止灌注过程中液体冲洗细胞。 独特的特点:特有的代谢灌流系统、超长时间的连续实时记录、可观察再生效应 |
灌流系统:如果需要测量产酸率和呼吸作用,灌注系统是必需的。可以看到细胞生长于芯片表面,标准版流体压头距离芯片表面的距离有200μm(也有50μm的替换版),这样流体压头和芯片表面的空间大约为6μl。液体从外界经管道流到芯片中间后扩散至表面。在灌注的阶段(go‐phase),传感器测量的是注入的新鲜培养基中的pH值和氧气浓度,这个数值会达到一个稳定期。随后灌注停止,随着细胞生理活动消耗氧气并且产生酸性代谢产物,芯片会测量到pH值的变化和氧气的消耗。经过几分钟后(通常是1-4分钟),再次灌注新的培养基,各个测量参数又会重新回到新鲜培养基的标准参数。
长时间连续记录和再生效应:独有的换液系统使得细胞培养环境始终保持新鲜,能够连续观察十几天,并监测再生效应 - 可以长时间监测细胞对于药物的反应
- 可以评估细胞群的再生回复状态
- 可以通过反复加药和清洗来观察细胞的适应性和耐药性
芯片的组成: ☆ 细胞可以在传感器表面培养,传感器芯片作为培养孔 ☆ 可对芯片表面进行包被,芯片只需简单预处理即可使用 ☆ 可以应用到不同的细胞系,自动化控制加样液体 IMOLA-IVd系统/IMR系统系统的核心就是SC1000传感器芯片,每个芯片含有多个不同类型的传感器元件,分别测量不同的生理学参数,具体包括: ☆ ISFETs(离子敏感场效应晶体管):测量细胞外环境的pH值变化即产酸率, ☆ OS(改进型clark型电极):测量氧气浓度即呼吸作用; ☆ IDES(交叉的电极结构):测量细胞的贴壁电阻即粘附和融合度; |