货号：
BJ-15917
保存条件：
低温冷藏
供应商：
上海邦景
保质期：
详见说明书
CAS号：
详见说明书
英文名：
详见说明书
规格：
100管/48样
产品名称：总巯基测试盒(微量法)规格
英文名称：产品规格：100管/48样发货周期：1～3天测定意义:生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。测定原理：巯基基团与5,5’- 二硫代-双甲酸(DTNB)反应，生成黄色化合物，在412nm处有吸收峰。自备实验用品:天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿和蒸馏水
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)Z好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。Z好在1h内检测。
注意事项：
总巯基测试盒(微量法)规格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.GSH CoFactor Mixture （1 ea） GSH CoFactor MixtureFoloxatine， Transplatin， Eloxatin， Eloxatine， Elplat， RP 580， Dacplat， Oxalato（1R，2Rcyclohexanediamine）platinum（II）， Oxalatoplatin， Oxalatoplatinum OxaliplatinCAY10608 （10 mg） N[4[（2S）3[[2（3，4dichlorophenyl）ethyl]amino]2hydroxypropoxy]phenyl]methanesulfonamide； CAY10608PAF C Carboxylic Acid （5 mg） CPAGP|Plateletactivating Factor C Carboxylic Acid； 7（acetyloxy）24carboxy4hydroxyN,N,Ntrimethyl4oxide（R）3,5,9trioxa4phosphatetracosan1aminiumNU 1025 （50 mg） 8hydroxy2methyl4（3H）quinazolinone； NSC 07； NU 1025XLR11 (1 mg) 5fluoro , XLR11, (1(5fluoropentyl)1Hindol3yl)(2,2,3,3tetramethylcyclopropyl)methanoneDL组酸shēng huà shì jì容量：500克10433氘代本BENZENED6水合500克FmocD天冬酰胺 FmocDAsnOH,≥98.0% 108397 1G 通用试剂典醋 Iodic ccid 82LASPARAGINEANxy7noUSL天门冬酰胺,无水高级白色精细粉末RTsigma七拂烷(特殊运输) Sqvoflurcnq 82666Bromo2chloro3metxoxypxenylboronic acid 70625安格洛苷 Angoroside C (≥98%,HPLC) 023 20MG 标准品L甲乙酯盐酸盐/L蛋酸乙酯盐酸盐/LMine ethyl ester hydrochloride 特，99.0% 5克 国产/进口SS agar Salmonella-Shigella agar SS琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂 1.07667.0500 MERCK默克 incubation media SS agar Salmonella-Shigella agar SS琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂 1.07667.0500 MERCK默克SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 琼脂/沙门氏菌-总巯基测试盒(微量法)规格WLN培养基250g用于酿造和工业发酵过程中细菌、酵母菌和霉菌培养Campy-Cefex琼脂基础 100(g) incubation media Campy-Cefex琼脂基础 100(g)霉菌和酵母菌显色培养基配套平皿 Mould And Yeast Chromogenic Medium Dish 9㎝/块PYG液体培养基基础250用于双歧杆菌增菌培养，使用时需加入氯化血红素和维生素K准)incubationmediaPYG液体培养基基础250用于双歧杆菌增菌培养，使用时需加入氯化血红素和维生素K
温馨提示：不可用于临床ZL。
