正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒规格_详细资料

产品信息

货号： YSRIBIO-C1280 保存条件：低温冷藏供应商：上海研生保质期：详见说明书 CAS号：详见说明书数量： 22 规格： 100T

实验报告：
一、正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒规格分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒规格
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
正常细胞/凋亡细胞/坏死细胞检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。染色液A可以透过正常细胞膜，而细胞凋亡后，细胞膜对染色液A的通透性增加，染色液B不能透过细胞膜，对正常细胞和凋亡细胞不能染色，而对坏死细胞可以染色。用两种染色液对细胞进行双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为正常细胞为低蓝色/低红色(A+/B+)，凋亡细胞为高蓝色/低红色(A++/B+)，坏死细胞为低蓝色/高红色(A+/B++)。
储存条件-20℃避光保存。避免反复冻融。
有效期一年。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在产品：
Meso-四(3,5-二溴-4-羟)卟啉3,3-二四盐盐/硒试剂/3,4,3′,4′-四四盐盐/3,3-二盐盐/(1,1-)-3,34,4-四四盐盐/DAB
2--5-溴啶-4-羧3,6-二荧光素/3ˊ,6ˊ-二荧光橙红/3ˊ,6ˊ-二荧光红/3ˊ,6ˊ-二荧光黄/3ˊ,6ˊ-二荧/化荧光素/3,6-Dichlorofluoran
6-溴-5--1H-吲唑二荧光素/2ˊ，7ˊ-二荧光素/2ˊ，7ˊ-二荧光黄/2,7-二-3,6-二羟螺异并-1(3H),9-(9H)占吨-3-/Fluorescein dichloride
3-溴-4-异腈二萤光素/二荧光素/荧光素二盐/荧光素二酯/二酰荧光素/荧光素双酯/FDA
6-啶-3-异荧光素/异荧光橙红/异荧光黄/异荧光红/异荧光素酯/异荧光素异构体I/5-异荧光素/FITC
(9--9H--2-)3,3,5,5-四-Stop/TMB-Stop solution
四-(4-氧)烯3,3,5,5-四-US/TMB-US(ultra sensitive) solution
3-三-1H-5-唑3,3,5,5-四盐盐/TMB盐盐/3,3,5,5-四/TMB•2HC1
4--2--3-3,3,5,5-四底物溶/TMB底物溶/3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid membrane substrate
2,5-二-3-腈3,3,5,5-四溶/TMB游离溶/TMB溶/3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid-1 component
正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒规格2,8Dimethylquinoline2,8二1463178
3NITROPROPIONIC ACID3504881
2(METHYLTHIO)ETHYLAMINE2(代)18542422
FluoroN,N,N',N'tetramethylformamidinium hexafluorophosphate四代脲六164298231
2Chloro5fluoropyrimidine25嘧啶62802420
LProline benzyl ester hydrochlorideL脯苄16652714
Methyl cyclopropane carboxylate环2868373
Tangerine oil红桔油8008319
4,5Diaminopyrimidine4，5二嘧啶13754193
WUWEIZISU C五味子素61301335
NEthylN(3sulfopropyl)aniline sodium saltNN（3）82611856
2,2Dimethoxy2phenylacetophenone安息香双24650428
3,4Dimethoxythiophene3,4二51792348
ALLYL METHYL ETHER627407
Polygalacic acid远志22338712
柠檬E 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
巨大戟3,45,20双缩 77573445 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
DHApaclitaxel 199796526 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
长春汀 42971095 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
酰紫草素 24502781 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
叶绿 150867 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
吴茱萸 15266383 订购|咨询规格 HPLC≥98%;10mg
三尖杉 24316196 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
8去酰滇乌 110011773 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
尿素 57136 订购|咨询规格 HPLC≥98%;50mg
雷公藤 37239477 订购|咨询规格 HPLC≥98%;10mg
角鲨 7683649 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
格列喹 33342051 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
当归酰异五味子素O 83864704 订购|咨询规格 HPLC≥98%;10mg
并黄素 604591 订购|咨询规格 HPLC≥98%;20mg
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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