货号：
YSRIBIO-C1166
保存条件：
低温冷藏
供应商：
上海研生
保质期：
详见说明书
CAS号：
详见说明书
数量：
31
规格：
10ml
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Hoechst 33258 染液(即用型)价格
英文名称：
产品规格：10ml发货周期：1～3天
本系列产品均以溶液形式提供，其中Hoechst33258染液(1mg/ml)（SY0562）为特定浓度的产品，其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst33258染液(即用型)（SY0498）为浓度经过优化的产品，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品，可选购Hoechst33258（SY0497）。Hoechst33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可用于活细胞或组织的细胞核染色。中文名称二苯甲亚胺,三氯化氢2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑英文名称2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole,Trihydrochloride；bisBenzimideH33258;HOE33258分子式C25H24N6O·3HCl分子量533.88CAS23491-45-4纯度≥95%（HPLC）储存条件-20℃，有效期12个月【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的Z好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
反式肉桂酸酯/羊蜡酸酯/Ethyl caprate 4-(叔基二基硅氧基)基酸高酸/仲高酸/一缩原高酸/过酸/Periodic acid 去托品醇盐酸盐甘油三酸酯/三酸甘油酯/三酷酸甘油酯/甘油三酷酸酯/三酪酸甘油酯/Glycerol tributyrate 异酸2-溴酯腐殖酸/腐植酸/腐质酸/黑腐酸/黄腐酸/HA 2,3,4-三腈γ-亚麻酸/γ-亚油酸/全顺式-6,9,12-十八碳三烯酸/6,9,12-十八碳三烯酸/γ-Linolenic acid 1-Cbz-4-(酰氧基基)啶亚麻酸/亚麻油酸/9,12,15-十八碳三烯酸/α-亚麻酸/Linolenic acid 1-糠基钛/钛/海绵钛/Titanium 5-溴-2,4-二基比林/匹拉米洞/匹拉米董/二基安替比林/4-二基-1,5-二基-2-基-3-唑啉/4-二基安替比林/基啉/1-基-2，3-二基-4-二基唑-5/Aminopyrine 4-羟庚酰/N-酰/酰/N-基酸/退/Acetanilide 5-溴-2,4-二角豆胶/洋槐豆胶/槐豆胶/长角豆胶/刺槐豆胶/Locust bean gum
Hoechst 33258 染液(即用型)价格LAMP扩增 规格HPLC≥98%;50mgChaff flower rootLAMP可见光染料 规格HPLC≥98%;20mgNomilinLAMP扩增阳性对照 规格HPLC≥98%;20mgligustroflavone核稀释，测OD专用 规格HPLC≥98%;50mgLevistilide A通用型LAMP试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgImperatorin通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgWedelolactone其它扩增试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgGypenoside XVII3'-O-Me-m7G(5')ppp(5')G帽结构类似物 规格HPLC≥98%;20mgEscin monosodium saltATP溶，100 mM 规格HPLC≥98%;20mgAlnustoneATP溶，2.5 mM（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgFisetinCTP溶，100 mM 规格HPLC≥98%;20mgOleanolic acidCTP溶，2.5 mM（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgKirenolG(5')ppp(5')A帽结构类似物 规格HPLC≥98%;20mgOroxylin AG(5')ppp(5')G帽结构类似物 规格HPLC≥98%;20mgOroxylin A 7-O-glucuronideGTP溶，100 mM 规格HPLC≥98%;20mgCepharanthine
操作步骤(仅供参考)：
1、Hoechst 33258 染液(即用型)价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
温馨提示：不可用于临床ZL。
