CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂说明书_详细资料

产品信息

货号： YSRIBIO-C1157 保存条件：低温冷藏供应商：上海研生保质期：详见说明书 CAS号：详见说明书数量： 22 规格： 100μl

实验报告：
一、CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂说明书分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂说明书
英文名称：
产品规格：100μl
发货周期：1～3天
本品是溶于DMSO的CCCP溶液，浓度为50mM，体积为100μl（相当于1mg的总量），常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡，并配合线粒体膜电位检测探针JC-1（货号SY0488）或者JC-10（货号SY0490）来进行相关研究。
CCCP，即Carbonylcyanide3-chlorophenylhydrazone，一种质子载体（H+ionophore），是一种的线粒体氧化磷酸化解偶联剂，促使线粒体内膜对H+产生通透性，导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失，诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜，YZ光合作用；CCCP还可YZ内质网-高尔基体（ER-Golgi）之间的蛋白转运，高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能
1）在牛蛙交感神经方面的实验表明，CCCP可增强促黄体生成素释放激素的释放；
2）作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli细胞活性；
3）对细胞内钙水平的各种调节效应；
4）YZ脂肝酶的分泌；
5）部分YZpH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。
储存条件-20℃，有效期12个月
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在产品：
埃索美拉唑草酸锶/Strontium oxalate
月桂酸锂锶/天青石/Strontium sulfate
二基碳酸锶/Strontium carbonate
3-基啶-2-羧酸基硅油I/基硅油201-350/Methylsilicone oil I
(3AR,7AS)-REL-八-1H-异吲哚盐酸盐基硅油DC200/二基硅油/硅油/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Dimethylsilicone fluid
1-基环醇基硅油/二基硅油/硅油/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Dimethylsilicone fluid
4'-溴-2,2,2-三硅油Ⅲ/基硅油274/基硅油/45%基/基硅油III/基基硅油III/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Silicone
5-基尿甙硅油Ⅱ/基硅油250/基硅油/17%～19%基/基硅油II/基基硅油II/DC510/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Silicone
4--3-酸硅油I/基硅油255/基硅油/23%～25%基/基硅油I/基基硅油I/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Silicone
5,6,7,8-四-8-羟基硅油H201-1000/基硅油274/基硅油/45%基/基硅油III/基基硅油III/聚硅氧/二聚硅氧/有机硅油/Silicone
CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂说明书Denhardt溶，50× 规格HPLC≥98%;10mgCorosolic Acid
DNA探针变性规格HPLC≥98%;10mgTheobromine
Southern封堵（NC专用）规格HPLC≥98%;20mgMatrine
Southern封堵（Nylon专用）规格HPLC≥98%;20mgKurarinone
SSC溶，20× 规格HPLC≥98%;20mgBlinin
SSPE溶，20× 规格HPLC≥98%;20mgBlinin
超级杂交（A型）规格HPLC≥98%;20mgAmygdalin
超级杂交（B型）规格HPLC≥98%;20mgMandelic acid
超级杂交（Oligo探针）规格HPLC≥98%;20mgTussilagone
超级杂交（芯片）规格HPLC≥98%;20mgCapsaicin
超级杂交（原位杂交）规格HPLC≥98%;20mgRebaudioside A
鲱鱼精DNA溶规格HPLC≥98%;5mgglaucocalyxin A
鲑鱼精DNA溶规格HPLC≥98%;20mgGeraniin
酵母tRNA溶,5mg/mL（精提）规格HPLC≥98%;20mgDimethoate
酵母tRNA溶A,5mg/mL（粗提）规格HPLC≥98%;20mgTriptophenolide
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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