货号:
YSRIBIO-C0963
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海研生
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
详见说明书
数量:
37
规格:
50T
中文名称:乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)说明书
英文名称:详见说明书
产品规格:50T
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天用途:主要用于检测植物样本、血清等中乙醇脱氢酶活性注意事项:检测原理是在弱碱条件下,以乙为底物,乙在ADH催化下被NADH还原为乙醇,每ADH催化1分子乙消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(分光光度计)测定340处吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出乙醇脱氢酶性水平储存条件:-20℃,避光,6个月实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在产品:
腺苷单活化蛋白激酶α1抗体原薯蓣皂甙BEND6BEND6蛋白抗体96T/48T原装、分装Lipase规格:20000U/g,BR蛇床子素c-ABL1/2(Tyr393/429)化非受体酪激酶c-Abl抗体96T/48T原装、分装Liothyroninesodium规格:>97.0%,BR麝香NF-κBp105/p50(Phospho-Ser373)化细胞核因子p50/k因结合核因子抗体96T/48T原装、分装Linolenicacid规格:≥98.5%(GC),分析标准品山phospho-C-Myc(Thr373)化致癌因C-Myc抗体96T/48T原装、分装Linoleicacid规格:分析标准品,≥99.0%(GC)水杨苷Lin28RNA结合蛋白LIN28抗体96T/48T原装、分装SCP3TPTE神经甘肽样肽GALP抗体Linifanib(ABT-869)规格:>98%,VEGFR/PDGFRYZ剂S100A10TACC1甘肽受体2抗体Linezolid-d3规格:美国进口Phospho-Stat2 (Tyr690)TBRG4甘肽受体3抗体Linderane规格:HPLC≥98%,标准品phospho-STAT3 (Ser727)TYK3脑肠肽受体抗体LincomycinHCl规格:>850mcg/mg,BRPhospho-Stat4 (Tyr693)phospho-TYK3(Tyr402)GRC5蛋白抗体LincomycinHCl规格:HPLC含量测定Phospho-Stathmin (Ser16)TRPM1肠和大脑特定同源蛋白1抗体
乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛比色法)说明书2’-5’oligoadenylates synthesisDEAE纤维素 (DE52)monoacylglycerol O-acyltransferase葡聚糖 T-2000 (右...immunogbulin Isotyping葡聚糖 T-500 (右旋...Brucella IgG Antibody葡聚糖 T-70 (右旋...Acetyl Histone H3葡聚糖 T-40 (右旋...histone H3葡聚糖 T-10 (右旋...pmlyl-4-hygroxylase 1叉双酰 (电...Cholesterol-25-Hydroxylase叉双酰 (超...Trichinella antibody过铵 (ACS级)Follistatin-related protein 1过铵 (电泳级)
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
温馨提示:不可用于临床ZL。