货号:
GOY-N0914
组织来源:
详见说明书
相关疾病:
详见说明书
物种来源:
详见说明书
免疫类型:
详见说明书
细胞形态:
淋巴母细胞样
是否是肿瘤细胞:
否
器官来源:
详见说明书
运输方式:
详见说明书
年限:
详见说明书
英文名:
Z01
注册证号:
详见说明书
数量:
34
供应商:
上海谷研
CAS号:
详见说明书
肿瘤类型:
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细胞类型:
贴壁生长
ATCC Number:
Z01
品系:
详见说明书
规格:
详见说明书
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台; 产品名称 | 抗赭曲霉毒素A7说明书 |
种属 | Z01 |
价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 抗赭曲霉毒素A7
种属:Z01形态:淋巴母细胞样培养方法培养基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS传代方法:保持细胞密度在1×105~1×106cells/ml之间,每周换液2~3次生长特性:半贴壁生长存储条件:基础培养基+8%DMSO+20%FBS收到细胞后,在倒置镜下(4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
抗赭曲霉毒素A7说明书具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
MSPD3 Polyclonal Antibody 精子运动结构域3 抗体JIP4 Polyclonal Antibody 精子相关抗原9 抗体Acrosin Polyclonal Antibody 精子头粒蛋白 抗体SPAG8 Polyclonal Antibody 精子关联抗原8 抗体SPAG5 Polyclonal Antibody 精子关联抗原5 抗体DKKL1 Polyclonal Antibody 精子顶体相关蛋白Dkkl1 抗体ATE1 Polyclonal Antibody 精氨酰转移酶1 抗体AVP Receptor V3 Polyclonal Antibody 精氨酸升压素受体3 抗体AVP Receptor V2 Polyclonal Antibody 精氨酸升压素受体2 抗体AVPR1A Polyclonal Antibody 精氨酸升压素受体1A 抗体
抗赭曲霉毒素A7说明书Vinblastine产品规格:100μl|500μl浓度:1mg/mL in DMSO分子量:811纯度:>98%(HPLC)储存:-20℃,有效期12个月