EGFRYZ剂(AZD-9291)说明_详细资料

产品信息

货号： BJ-11256 保存条件：低温冷藏供应商：上海邦景保质期：详见说明书 CAS号：详见说明书英文名：详见说明书数量： 42 规格： 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：EGFRYZ剂(AZD-9291)说明
英文名称：AZD-9291
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
AZD-9291是不可逆的突变体选择性EGFRYZ剂；对EGFRL858R和EGFRL858R/T790M的IC50值分别为12和1nM。
注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他用途！
CAS号：1421373-65-0
别名：Osimertinib;Mereletinib
纯度：99.95%
分子量：499.61
储存条件：-20℃，有效期2年，

使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)Z好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。Z好在1h内检测。
注意事项：
EGFRYZ剂(AZD-9291)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
葡聚糖凝胶G25shēng huà shì jì容量：10KU
3310氮杂冠醚61Azacrown 6
Spiro[2.5]oct5en6yl boronic acid pinacol ester 8
基乙酸酯 Trimethylsilyl acetate,98% 270 25G 通用试剂
十三烷色谱标准品 Nc
青霉素G钠，英文名或英文缩写：Penicillin G Na salt，级别：寡肽级，90%，规格：5克
十六拂29H 31H酞菁锌 ZINC 1,2,3,4,8,9,10,11,,,,,22,23,24,25HqXcDqCcFLUORO29H,31HPHTHcLOCYcNINq 9
metxyl 3(chlorosulfonyl)4pxenyl5(trifluorometxyl)thiopxene 3035988
甲基异丁基甲酮 4Methyl2pen,≥99% 108101 100ML 通用试剂
十八冠醚6/1,4,7,10,,六氧环十八烷/冠醚6/冠6醚/王冠醚/冠6/Crown6 BR，99%， 100克国产/进口
D泛酸钙，英文名或英文缩写：VB5，级别：IND，规格：5克
10026036四录化硒Selenium(IV) chloride (8 mesh)
2[(trimetxylsilyl)metxyl]Thiopxene 552
2异酸乙酯 2Chloroethyl isocyanate,97% 835 5G 通用试剂
N芴氧碳酰基2.2.4.6.7五基二轻本并5磺酰L精安醋 Nc
培养板   赖酸包被12孔培养板   5个/包,50个/盒
WHB 离心管   15ml锥形离心管(泡沫架装),USP VI级,灭菌   50个/包,1600个/箱
细胞培养皿   TC处理标准透明150mm细胞培养皿   1个/包,60个/箱
WHB 真空式过滤器   150ml真空式过滤器,PES(聚醚砜)膜,0.45um孔径,灭菌   1个/包,12个/箱
EGFRYZ剂(AZD-9291)说明犬源细胞
人间充质干细胞(肝脏)cDNAHMSC-hp cDNA
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
U937细胞，组织细胞淋巴瘤人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系,PG-LH7细胞肠动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
CL-0292MKN45(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

温馨提示：不可用于临床ZL。

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