Porcine EG-VEGF ELISA Kit

完整的elisa试剂盒主要的组成成份如下：
1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)；
2、C的抗原或抗体(结合物)；
3、酶的底物；
4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参考标准品和控制血清(定量测定中)；
5、结合物及标本的稀释液；
6、洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；
     7、酶反应终止液，常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的Z终体积而异，在板式ELISA中一般采用2mol/L。
Porcine EG-VEGF ELISA Kit保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
公司提供ELISA Kit为我司主营产品之一，产品皆严格按照相关标准进行生产，并经过了严格地反复地检测，我们以严谨的态度保证产品的质量，从而保证您的实验顺利进行。产品名称供货周期短，供货及时，且我司还提供完整的售前和售后服务。

产品名称	Porcine EG-VEGF ELISA Kit
英文名称	Porcine EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit
规格	48T/96T

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中AIF水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入AIF抗原、生物素化的抗小鼠AIF抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的AIF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。简易原理示意图如下：

注意事项：
1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。
3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30 min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。
5. 为避免交叉污染，请在试验中使用 1 次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。
6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上，使用前请离心处理（5-10 S 即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹打几次。
7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。
8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。 

操作步骤计算：
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 
样品收集: 
1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集
血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 
2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。 
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。 
4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 
5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测 
6. 样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。 
7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。 
8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先做预实验，以确定稀释倍数）。
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