磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶测试盒(紫外分光光度法)说明书_详细资料

产品信息

货号： YSRIBIO-C0519 保存条件：低温冷藏供应商：上海研生保质期：详见说明书 CAS号：详见说明书英文名：详见说明书数量： 44 规格： 50管/48样

实验报告：
一、磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶测试盒(紫外分光光度法)说明书分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶测试盒(紫外分光光度法)说明书
英文名称：详见说明书
产品规格：50管/48样
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
测定意义:
PFK(EC 2.7.1.11)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解过程的关键调节酶之一。
测定原理：
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PFK活性。
需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在产品：
Klebsiella spp.克雷伯菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase英文名称ZNF568绿色荧光蛋白抗体
Klebsiella spp.克雷伯菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒ATF1 (Activating Transcription Factor1)英文名称ZNF473绿色荧光蛋白抗体
Kobuvirus嵴病毒RT-PCR试剂盒NPS/Neuropeptide S英文名称ZFAND5G蛋白通路YZ蛋白1抗体
Kobuvirus嵴病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒NKB (Neurokinins B)英文名称ZNF146胶质细胞系源性神经营养因子受体α2抗体
Kobuvirus嵴病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒ATF2 (Activating Transcription Factor2)英文名称ZNF23核突触蛋白-γ抗体HPLC≥98%Ⅰ型胶原N末端肽检测试剂盒5mgIA
ophiopogoninD'规格：HPLC≥98%，标准品特纯，98%>90.0%(HPLC)100gGHtuberostemonineAnti-Phospho-PLK1(Ser137)酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体Anti-Phospho-PLK1(Ser137)酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体48T/96THPLC≥98%Ⅰ型胶原C端肽检测试剂盒5mg6-keto-PGF1a
特纯，98%>90.0%(HPLC)25gGHRP-GhrelinDocetaxelAnti-PMP22外周髓鞘蛋白-22抗体Anti-PMP22外周髓鞘蛋白-22抗体48T/96THPLC≥98%Ⅰ型胶原检测试剂盒5mgP
特纯，98%97%5gGRFCurdioneAnti-PMS2肿瘤错配修复基因PMS2抗体Anti-PMS2肿瘤错配修复基因PMS2抗体48T/96TAR，98%97%100gGROβ;CXCL2;MGSACurcumolAnti-PNAT/NAT2N-酰基转移酶2抗体Anti-PNAT/NAT2N-酰基转移酶2抗体48T/96THPLC≥98%1型1-酸鞘氨醇受体检测试剂盒5mgSMR
AR，98%25gGas6(+)-CatechinAnti-PNK1/PNKP多聚合苷酸激酶3酸化酶抗体Anti-PNK1/PNKP多聚合苷酸激酶3酸化酶抗体48T/96THPLC≥98%17-类固醇检测试剂盒5mgCD13
AR，98%500gGAP-43DihydrotanshinoneIAnti-Phospho-PNK1(Ser114/Thr118)酸化多聚合苷酸激酶3酸化酶抗体Anti-Phospho-PNK1(Ser114/Thr118)酸化多聚合苷酸激酶3酸化酶抗体48T/96THPLC≥98%17-羟孕烯醇ELISA试剂盒5mg11βHSD2
磷酸果糖激酶(PFK)/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶测试盒(紫外分光光度法)说明书Legumain戊二酰氯
Roundabout, Axon Guidance Receptor, Homolog 4对基酰氯
staphylococcus aureus Cas9 antibody2-氧基氧基基氯
staphylococcus aureus Cas91-萘磺酰氯
NIS4-氧基酰氯
NIS-Ab4-氧基磺酰氯
Knockout Forkhead Box Protein N3
programmed death Ligand 1 antibody4-氯酰氯
Interleukin 142,6-二氯氯
Solute Carrier Family 27 Member 42,4-二氯酰氯
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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