货号:
YSRIBIO-C0372
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海研生
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
详见说明书
数量:
20
规格:
50管/48样
中文名称:γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格
英文名称:详见说明书
产品规格:50管/48样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天测定意义:GCL 是 GSH 合成的限速酶,GSH 对 GCL 有反馈YZ作用。GCL基因表达受多种因素调节,如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。测定原理:在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同时ATP去磷酸化产生无机磷分子,通过测定无机磷毫摩尔数,即可计算出GCL活性。实验中所需仪器及设备:可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1ml比色皿、双蒸水。实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在产品:
Fusarium sporotricoides拟枝孢镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒48T/96TELISAKitforEctonucleotidePyrophosphatase/Phosphodiesterase6(ENPP6)卫矛醇半固体发酵管Fusarium sporotricoides拟枝孢镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒48T/96TELISAKitforLipaseK(LIPK)V-P半固体琼脂发酵管Nanog fragmentSMAD9转录调节因子HOXD9抗体Fusarium spp.镰刀菌通用PCR试剂盒Natrexone/BSANatrexone/KLHSNF5羟基酰谷胱甘肽水解酶样蛋白抗体Fusarium spp.镰刀菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒NAP1 (nucleosome assembly protein 1)SH2D1A热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体Fusarium spp.镰刀菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒N-cadherinSIGLEC9Heme结合蛋白2抗体Phoxim规格:分析标准品,99%E-cadherinSalusin alpha肝细胞粘附分子2抗体PhosphoricAcid-D3(D,99%)规格:D,99%Nephrin ProteinS100B己糖苷酶D抗体Phosphoramidondisodiumsalt规格:0.99NeurocanSOX11HHLA2蛋白抗体Phosphomolybdicacidhydrate规格:BCNF2/merlin(neurofibromatosis type 2)SERBP1羟脯氨酸抗体PhospholipaseA2fromCrotalusadamanteusVenom规格:比活性:>200U/mg,BCSLN英文名称TORC2脑肠肽抗体
γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格Echinococcus granulosus IGM蒽醌Echinococcus granulosus IgG2-氯蒽醌Neopterin antibody醌醌myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody1,4-二羟基蒽醌Chlamydiapneumoniae IgM1,8-二羟基蒽醌Chlamydiapneumoniae IgG苊醌Bruton'S Tyrosine Kinase2-氯蒽醌rheumatoid factor IgG2-氯-1,4-醌rheumatoid factor IgA四氯醌rheumatoid factor IgM2-基蒽醌
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
温馨提示:不可用于临床ZL。