货号:
YSRIBIO-C0205
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海研生
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
Glycerol Assay Kit
数量:
58
规格:
300T
培养操作步骤:
1.甘油含量测试盒(液体)(微量酶标法)哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 中文名称:甘油含量测试盒(液体)(微量酶标法)哪家好
英文名称:Glycerol Assay Kit
产品规格:300T
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天检测指标:甘油含量本试剂盒测定血液、细胞培养基、体液、酒类饮料中的甘油。在ATP存在下甘油被甘油激酶磷酸化为3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧化氢;在过氧化氢酶作用下生色底物转化为苯亚胺,光密度值与甘油浓度成正比。甘油是甘油三酯的水解产物。甘油三酯水解生成1 分子甘油和3 分子游离脂肪酸,称为脂肪分解。脂蛋白酯酶水解血中甘油三酯;胰脂酶水解食物中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶水解脂肪细胞中的甘油三酯。与游离脂肪酸一样,甘油含量是甘油三酯水解反应的可靠检测指标,但检测更加方便。本试剂盒采用甘油磷酸氧化酶法与经典GPO Trinder 酶学反应,通过比色测定液体样品甘油含量。试剂盒经过优化使得操作简单,检测灵敏度10μmol/L,线性范围10~1200μmol/L,可靠性和重复性俱佳。适合生物医学、食品实验室检测。样本处理1、酒精、饮品、清澈体液样本:直接测定,如超过线性范围用蒸馏水或生理盐水稀释后测定。2、培养液:取不含酚红无颜色无血清的细胞培养基液,如有细胞碎片应4℃条件下12,000g离心5min 清除,取上清测定。3、血液:新鲜抗凝血4℃ 2000g 5min 得到血浆,或非抗凝血4℃ 2 小时取血清。2000g 离心10min 除去血细胞。70℃ 10min 灭活内源脂肪酶,再次12,000g 10min,取上清测定或-20℃保存。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在产品:
Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)鸡胚致死孤儿病毒染料法荧光定量PCR试剂盒ANKRD26Bsh1285I (BsiEI)600 units猪α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)鸡胚致死孤儿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒ANKRD26Acc65I (Asp718I)1000 units猪αN酰葡糖胺糖苷酶(NAGLU)免疫试剂盒Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)鸡传染性贫血病毒PCR试剂盒ACY3Acc65I (Asp718I)5000 units猪α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)鸡传染性贫血病毒染料法荧光定量PCR试剂盒ARSKVspI (AseI)1000 units猪Tau蛋白免疫试剂盒Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)鸡传染性贫血病毒探针法荧光定量PCR试剂盒AmphiphysinVspI (AseI)5000 units猪Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫试剂盒Quercetin3-O-glucoside-7-O-rhamnoside规格:HPLC≥98%,标准品ZNF471英文名称SP1酸化成纤维细胞生长因子受体3抗体Quercetin规格:HPLC>98.0%,标准品Quartzsand规格:BRZDHHC21英文名称TEM1叉头相关结构域包含蛋白1抗体QingyangshengeninB规格:HPLC≥98%,标准品ZBTB1英文名称TRPC3串珠状纤维结构蛋白1抗体QingyangshengeninA规格:HPLC≥98%,标准品ZNF420英文名称TFDP3纤维调节蛋白抗体Pyrophosphoricacid规格:>45%,BRZNHIT1英文名称TRPV2酸化FANCD2抗体
甘油含量测试盒(液体)(微量酶标法)哪家好short-chain fatty acids三硼醇uric acid transporter 14-酸-2-(二...Ca-Mg-ATPaseα-基-4-羟基肉桂酸specific IgG4 against dust mite antibody辛可尼lupus anticoagulation薄荷His-Tag rabbit polyclonal硫specific IgE4 against dust mite antibody二基酸Brain derived neurotrophic facor氘Cytomegaoviyns IgM antibody1-基-1,2-二Breast Cancer Susceptibility Protein 1邻羟基苄醇
温馨提示:不可用于临床ZL。