货号:
YSRIBIO-C0163
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海研生
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
Adenosinetriphosphatase assay kit
数量:
57
规格:
100管/96样|50管/48样
中文名称:ATP酶试剂盒(测细胞膜、线粒体、微粒体等的Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本前处理需高速离心)(比色法)说明书
英文名称:Adenosinetriphosphatase assay kit
产品规格:100管/96样|50管/48样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天检测指标:ATP酶本试剂盒可测高速冷冻离心后的红细胞膜、组织细胞膜、线粒体、微粒体等样本中的ATP酶活力。ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷,测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。ATP酶存在于组织细胞膜及细胞器膜上,是生物膜上的一种蛋白酶,它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。产品优点如下:1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20l~50l即可测红细胞膜中的ATP酶,只需5mg左右组织就可测组织匀浆中的ATP酶、0.2g组织可测线粒体及微粒体中的ATP酶。6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。4、再现性好:变异系数CV=1.7%。5、回收试验: X =103.3%。6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。7、测试面广:可测试高速冷冻离心后的红细胞膜、组织细胞膜、线粒体、微粒体的ATPase。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.ATP酶试剂盒(测细胞膜、线粒体、微粒体等的Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本前处理需高速离心)(比色法)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在产品:
Brachyspira hyodisenteriae猪痢疾短螺旋体染料法荧光定量PCR试剂盒WDR19英文名称SMYD2酸化FMS样酪氨酸激酶3抗体HPLC≥98%核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,检测试剂盒20mgRvE2Brachyspira hyodisenteriae猪痢疾短螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥98%核糖核酸酶检测试剂盒20mgcTn-ⅠBrachyspira spp.短螺旋体通用PCR试剂盒HPLC≥98%核仁纤维蛋白抗体检测试剂盒20mgcTnTBrachyspira spp.短螺旋体通用染料法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥98%核基质蛋白22检测试剂盒20mgCT-1Brachyspira spp.短螺旋体通用探针法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥98%核黄素激酶检测试剂盒20mgANPRamiprilat规格:美国进口HPLC≥98%和肽素检测试剂盒20mgFABP3Ramipril规格:>98.0,BRHPLC≥98%汉坦病毒检测试剂盒20mgh-FABP48T/96TELISAKitforFibroblastGrowthFactor19(FGF19)发酵蛋白胨Ramipril规格:HPLC>98,标准品48T/96TELISAKitforS100CalciumBindingProteinA8(S100A8)BIGGY琼脂RamelteonMetaboliteM-II(mixtureofRandSatthehydroxyposition)规格:美国进口48T/96TELISAKitforInterleukin17F(IL17F)C.L.E.D培养Ramelteon规格:>98.5%β-D-Lactose,ca80%βand20%α99%,无水级100gAVPSanguinarineAnti-OPG骨保护蛋白/护骨素抗体Anti-OPG骨保护蛋白/护骨素抗体48T/96T48T/96TELISAKitforCollagenTypeXIII(COL13)C.L.E.D培养添加
ATP酶试剂盒(测细胞膜、线粒体、微粒体等的Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本前处理需高速离心)(比色法)说明书nicotinamide adenine dinucleotide phosphate1’-Hydroxy N-Trityl Medetomidinenicotinamide adenine dinucleotide7-O-Benzyldiosmetine-d3Nicotinamide mononucleotide adenylyltransferase 34-Methylumbelliferyl 2,3,4-Tri-O-benzoyl-6-O-(tert-butyldiphenylsilyl)-β-D-galactopyranosidecirculating immune complexL-Lysine ClonixinatePlatelet-Derived Growth Factor-D2-Chloro Fenofibric AcidPlatelet-Derived Growth FactorCitralPlatelet-Derived Growth Factor Receptor(R,R)-LabetalolPlatelet-Derived Growth Factor PDGF-β Receptor4-(2,3-Epoxypropoxy)phenylacetamidePlatelet-Derived Growth Factor PDGF-α ReceptorDapoxetine-d6 HydrochloridePlatelet-Derived Growth Factor-BBrac Fenfluramine Hydrochloride
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
温馨提示:不可用于临床ZL。