货号:
YSRIBIO-C0105
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海研生
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
Acid phosphatase assay kit
数量:
40
规格:
详见说明书
中文名称:酸性磷酸酶测定试剂盒(分光光度法)哪家好
英文名称:Acid phosphatase assay kit
产品规格:50管/48样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天检测指标:酸性磷酸酶;ACP酸性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉作用经铁化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。本试剂盒可测各种动物血清(浆)、组织、培养细胞、细胞培养上清等样本中酸性磷酸酶(ACP)活性。前列腺癌特别是发生转移时,血清ACP明显ZG,可高达正常上限的40~50倍。骨病ACPZG,来源于破骨细胞,不被酒石酸YZ,如Paget’s病、乳腺癌等骨转移、累及骨的甲状旁腺机能亢进。但也有的乳腺癌病例被酒石酸YZ的ACPZG。此外,Gaucher’s病及Niemann-Pick病、粒细胞白血病、因血小板过度破坏引起的血小板减少症等耐酒石酸的ACP也ZG;白血病时ZG程度与白细胞计数相关。非恶性的前列腺疾患如良性前列腺肥大、前列腺炎、前列腺梗塞等中的某些病例血清ACP亦可ZG。优点如下:1、快速简便:全程约40分钟,可测80例左右样本;5、回收试验: X =104%;2、取样量微:常规操作取样量50ul, 酶标仪操作仅需5l即可测样本中的ACP活力;3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效;4、再现性好:变异系数CV=1.2%,20倍稀释线性仍然良好;55、回收试验: X =104%;6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.酸性磷酸酶测定试剂盒(分光光度法)哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在产品:
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酸性磷酸酶测定试剂盒(分光光度法)哪家好phosphatidylserine10-姜酚phosphatidylinositol antibody IgG;IgM人参皂苷Rg3Glypican-3白术内酯ⅡGlypican-1雷公藤内酯phosphatidyl glycerol香兰素phosphatidylcholine血竭素高氯酸盐phospholipase A2 Receptor 1二欧山芹醇当归酸酯phospholipase A2 Receptor毛兰素phospholipase A2甘草酸二铵Phosphotylinosital 3 kinase银锻苷
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或ZL,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
温馨提示:不可用于临床ZL。