货号:
BHR1363
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海博湖
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
Borrelia burgdorferi
数量:
30
规格:
50T
荧光化学物质:
伯氏疏螺旋体(伯氏包柔螺旋体)探针法荧光定量PCR试剂盒多少钱实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。 产品名称 | 伯氏疏螺旋体(伯氏包柔螺旋体)探针法荧光定量PCR试剂盒多少钱 |
英文名称 | Borrelia burgdorferi |
货号 | BHR1363 |
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量Z准确,重现性定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物LX考核、病原体检测等诸多领域。通用原则:
1, 先选择好探针,然后设计引物使其尽可能的靠近于探针。
2, 扩增子的长度应不超过400bp,理想的Z好能在100-150bp内,扩增片断约短,有效的扩增反应就越容易获得。较短的扩增片断也容易保证分析的一致性
3, 保持GC含量在20%和80%之间,GC富含区容易产生非特异反应,从而会导致扩增效率的降低,及在SG分析中非特异信号。
4, 为了保证效率和重复性,应避免重复的核苷酸序列,尤其是G(不能有4个连续的G)
5, 将引物和探针互相进行配对检测,以避免二聚体和发卡结构的形成。
b),探针设计指导
1,在设计引物之前设计探针
2,探针的Tm值应在68-70℃之间,如果是目测探针,则要仔细审查GC富含区。
3,探针的5’端要避免有鸟氨酸,5’G会有淬灭作用,即使被切割下来这种淬灭作用也还会存在
4,选择C多于G的链作探针,G的含量多于C会降低反应效率,这时就应选择配对的另一条链作为探针。
6, 探针应尽可能的短,不要超过30个bp。
7, 检测探针的DNA折叠和二级结构。荧光定量PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。猪内皮型合酶(eNOS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素规格:48T/96T血液谷胱甘肽S转移酶(GSHST)总活酶动力性比色法定量检测试剂盒20次PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit猪B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T猪免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装猪免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装猪0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装大鼠活化素A受体抗体IgM(ACV-RAb IgM)ELISA试剂盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA KitRabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交联物(PY)ELISA试剂盒炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒 48TCLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽规格:48T/96T体液元素荧光定量检测试剂盒20次ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前胶原肽规格:48T/96TAKETOGLUTARICACID,FREEACIDα酮二酸高级白色至微黄色结晶或结晶粉末COLDsigma1057N,N二甲基1,3, 98+%3DimetxylaminopropylamineRNase&DNase清除剂shēng huà shì jì容量:25克二二醇单迷 2(2Mqthoxyqthoxy)qthcnol 13邻本二酸二正辛酯shēng huà shì jì容量:500克DPanthenol(R)2,4二羟基N(3羟基基)3,3二甲基丁酰胺25克AR,冷水不溶1醌Anthrainoneone;9,10entxneenedione;9,10Dioxoentxneene;Dixy7nodiketoentxneene;Ordinary anthrainoneone;MotA.C.E.SEQUENCINGBUFFER,10XCONCENTRATEA.C.E. 测序缓冲液 (10X)测序级无色无混浊溶液RTsigma3;3羌基;基炳基醇 3Hqxcnol;3xy7noxyh伯氏疏螺旋体(伯氏包柔螺旋体)探针法荧光定量PCR试剂盒多少钱吐温801公斤Catalase 1g/5g/10g原装 Sigma C22盐还原试剂(甲、乙液)shēng huà shì jì容量:1米清洗剂 Clqcning cgqnt大豆皇同 Dcidzqin 66
服务流程:
1.客户认真写好订单,提供待检基因相关信息;
2.签订技术服务合同,支付预付款(30-50%);
3.设计合成定量PCR引物(或客户提供文献引物委托本公司合成);
4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录;
5.PCR预实验,主要检测引物的特异性和扩增效率;
6.正式定量实验:对所有样品上机检测;
7.实验结果和数据分析,形成报告。
温馨提示:不可用于临床ZL。