货号:
EY-D9370
供应商:
上海一研
检测方法:
双抗体夹心ELISA法
应用:
ELISA法
适应物种:
详见说明书
标记物:
促黄体生成素
数量:
20
规格:
96 wells
产品名称:促黄体生成素
英文名称:LH (Lutenizing Hormone)
标本:
规格:96 wells
检测限:
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗LH (Lutenizing Hormone)抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的LH (Lutenizing Hormone)会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗LH (Lutenizing Hormone)抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗LH (Lutenizing Hormone)抗体与结合在包被抗体上的LH (Lutenizing Hormone)抗体结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。 试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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一类残留溶剂1,1,1三乙标准品 英文名称: CAS:叶标准品 英文名称: CAS:59303 氧雄龙相关物质C标准品 英文名称: CAS:氧雄龙相关物质B标准品 英文名称: CAS:4424457 氧雄龙相关物质A标准品 英文名称: CAS:氧沙星相关物质A标准品 英文名称: CAS:82419521 盐乙基去甲标准品 英文名称: CAS:3198070盐伊立替康杂质D对照品标准品 英文名称: CAS:盐伊立替康杂质C对照品标准品 英文名称: CAS:盐万古霉素标准品 英文名称: CAS:04939 盐头孢吡肟系统适应性用标准品 英文名称: CAS:盐坦索罗辛外消旋合物标准品 英文名称: CAS:80223990 盐舍曲林相关物质A标准品 英文名称: CAS:盐舍曲林外消旋混合物标准品 英文名称: CAS:79617893 盐噻加宾外消旋混合物标准品 英文名称: CAS:羧肽酶A(牛胰) 订购|咨询 进口/国产 100克羧肽酶B(猪胰) 订购|咨询 进口/国产 1公斤羧肽酶Y(酵母) 订购|咨询 进口/国产 1克丁酰胆酯酶 订购|咨询 进口/国产 5克胆酯酶 订购|咨询 进口/国产 25克胰凝乳蛋白酶原 订购|咨询 进口/国产 100克弹性蛋白酶(猪胰) 订购|咨询 进口/国产 10克半乳糖氧酶 订购|咨询 进口/国产 100克
Polyporus别 名 MAP kinase 12; MAP kinase p38 gamma; MAPK 12; Mapk12; Mitogen Activated Protein Kinase 12; ERK6; ERK 6; ERK-6; Extracellular signal-regulated kinase 6; Mitogen activated protein kinase 3; Mitogen activated protein kinase p38 gamma; Mitogen-activated protein kinase 12; Mitogen-activated protein kinase p38 gamma; MK12_HUMAN; P38 GAMMA; P38GAMMA; PRKM12; SAPK 3; SAPK3; Stress Activated Protein Kinase 3; Stress-activated protein kinase 3.浓 度 1mg/1ml规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg抗体来源 Rabbit克隆类型 polyclonal交叉反应 Human, Mouse, Rat产品类型 一抗研究领域 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 细胞粘附分子 细胞分化蛋白分子量 predicted molecular weight:42kDa 性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SAPK3/MAPK12/p38gamma亚 型 IgG纯化方法 affinity purified by Protein A储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
操作流程如下:
(1)LH (Lutenizing Hormone)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。