APOE人源化小鼠

APOE基因编码一个称为apoE的脂蛋白元（apolipoprotein)，主要在肝脏和大脑中表达，主要功能是参与胆固醇的吸收，合成和分配。APOE基因有三种常见的变异型，分别是E2, E3和E4变异型，互相之间，仅有一个核苷酸的区别，目前已确认APOE基因E4变异是Z主要的老年痴呆症风险变异。研究发现携带一条E4变异的人群，罹患老年痴呆症的风险增加3倍，而携带二条E4变异，得病风险增加12倍。并且携带E4变异的患者症状出现得更年轻，病程发展更快，脑中的淀粉样蛋白斑块也更多更大更结实。（Nat Rev Neurol. 2013 Feb; 9(2): 106–118）

以下数据包括APOE2-HU, APOE3-HU, APOE4-HU三种小鼠的构建策略和鉴定数据。

构建策略

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE2人源化小鼠构建策略。

鉴定结果

Fig2. 鉴定结果图。引物对 P1/2 特异针对野生型及基因敲除小鼠，引物对 P3/4 特异针对APOE2人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物对可扩增出 342 bp 产物; KO小鼠用 P1/2 引物对无条带,人源化小鼠用 P3/4 引物对可扩增出 332 bp 产物。

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot 检测发现 APOE2 蛋白在人源化小鼠中有高表达。

APOE抗体：Sc-13521(santa cruz)

构建策略

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE3人源化小鼠构建策略。

鉴定结果

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot 检测发现 APOE3 蛋白在人源化小鼠中高表达。

APOE抗体：Sc-13521 (santa cruz)

构建策略

 Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE4人源化小鼠构建策略。

鉴定结果

Fig2. 鉴定结果图。引物对 P1/2 特异针对野生型及基因敲除小鼠，引物对 P3/4 特异针对APOE4 人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物对可扩增出 342bp  产物;  KO 小鼠用 P1/2引物对无条带,人源化小鼠用 P3/4 引物对可扩增出332bp 产物。

引物对 P1/2 Wild type = 342 bp

引物对 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot检测发现 APOE4 蛋白在人源化小鼠中高表达。

APOE抗体：Sc-13521(santa cruz)