背景介绍 | 白细胞介素4(IL-4)是约18-20kDa的单体细胞因子。小鼠IL-4前体为140个氨基酸,由20个氨基酸组成信号肽,120个氨基酸组成成熟的肽链。成熟的小鼠IL-4与人和大鼠IL-4的同源性分别为43%和63%。IL-4可诱导幼稚辅助性T细胞(Th0细胞)分化为Th2细胞。Th2细胞受IL-4活化后,随后正反馈分泌IL-4。分泌IL-4诱导Th0细胞分化的细胞类型尚未得到鉴定,但近期研究表明,嗜碱性粒细胞可能是该效应细胞。IL-4与IL-13密切相关,且具有相似的功能。IL-4还可促使横纹肌肉瘤发生有丝分裂、去分化和转移。在过敏性哮喘病人中可观察到IL-4和其它Th2细胞因子参与了气道炎症。 |
检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠IL-4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的IL-4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入信号增强剂孵育,洗涤去除未结合的物质后,再次加入Streptavidin-HRP。洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-4的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570-630 nm)测定吸光度值。 |
组分 | 包被抗IL-4单克隆抗体的96孔聚苯乙烯酶标板 小鼠IL-4冻干标准品 IL-4检测抗体 标准品稀释液 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 信号增强剂浓缩液 信号增强剂稀释液 检测缓冲液(10×) 底物(TMB) 终止液 洗液(20×) 封板膜 |
分析类型 | 夹心ELISA |
样本类型 | 血清、血浆,细胞培养上清及其他生物学样本 |
板式 | 96孔板,可拆 |
保存 | 试剂盒未拆开,4℃保存。已拆开,标准品-20℃保存,其它4℃保存。 |
运输条件 | 4℃蓝冰运输 |
样本体积 | 20 μl |
灵敏度 | 0.08 pg/ml |
标曲图 | |
标准曲线范围 | 0.78pg/ml-50pg/ml |
回收率范围 | 75%-93% |
平均回收率 | 0.8 |
板间变异系数 | 4.4%-4.7% |
板内变异系数 | 8.3%-9.7% |