背景介绍 | 白细胞介素12 (IL-12)由树突状细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和人B淋巴母细胞株 (NC-37)在响应抗原刺激时自然产生。IL-12由4个а螺旋组成,是一个由2种独立基因--- IL-12A (p35)和IL-12B (p40)编码形成的异源二聚体细胞因子。蛋白合成之后可形成有生物活性的异源二聚体(p70)和同源二聚体p40。IL-12参与初始T细胞向Th1细胞分化的过程,作为T细胞刺激因子,它可刺激T细胞的生长及其功能发挥。IL-12具有抗血管生成活性,对自然杀伤细胞和T淋巴细胞活性有重要作用。同样地,IL-12与自身免疫相关。 |
检测原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠IL-12p70抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的IL-12p70与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入信号增强剂孵育,洗涤去除未结合的物质后,再次加入Streptavidin-HRP。洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中IL-12p70的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。 |
组分 | 包被抗IL-12p70单克隆抗体的96孔聚苯乙烯酶标板 小鼠IL-12p70冻干标准品 IL-12p70检测抗体 标准品稀释液 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 信号增强剂浓缩液 信号增强剂稀释液 检测缓冲液(10×) 底物(TMB) 终止液 洗液(20×) 封板膜 |
分析类型 | 夹心ELISA |
样本类型 | 血清、血浆,细胞培养上清及其他生物学样本 |
板式 | 96孔板,可拆 |
保存 | 试剂盒未拆开,4℃保存。已拆开,标准品-20℃保存,其它4℃保存。 |
运输条件 | 4℃蓝冰运输 |
样本体积 | 20 μl |
灵敏度 | 0.57 pg/ml |
标曲图 | |
标准曲线范围 | 7.81 - 500 pg/ml |
回收率范围 | 92 %-115 % |
平均回收率 | 1.04 |
板间变异系数 | 2.6 % - 3.1 % |
板内变异系数 | 2.2 % - 3.1 % |