人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒
检测范围:
8μg/ml - 160μg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中补体 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 水平。用纯化的人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 再与HRP标记的补体 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 浓度。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(320μg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
160μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
80μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
40μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
20μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
10μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
SMMC-7721(肝癌细胞) ATCC
SMC-1(胸膜细胞瘤) ATCC
QGY-7703(肝癌细胞) ATCC
NCI-H446 [H446](小细胞肺癌细胞) ATCC
QGY-7701(肝癌细胞) ATCC
BEL-7405(肝癌细胞) ATCC
NCI-H460 [H460](大细胞肺癌细胞0 ATCC
NCI-H460 [H460](大细胞肺癌细胞0 ATCC
BEL-7404(肝癌细胞) ATCC
BEL-7402(肝癌细胞) ATCC
QG-56(肺扁平上皮癌细胞) ATCC
SPC-A-1(肺腺癌细胞) ATCC
HGC-27(胃癌细胞(未分化)) ATCC
LTEP-a-2(肺腺癌细胞) ATCC
AGS(胃腺癌细胞) ATCC
MGC80-3(胃癌细胞) ATCC
95-D(高转移肺癌细胞) ATCC
BGC-823(胃腺癌细胞(低分化)) ATCC
BT549(乳腺管癌细胞) ATCC
SGC-7901(胃腺癌细胞) ATCC
T-47D(乳腺管癌细胞) ATCC
T-47D(乳腺管癌细胞) ATCC
TE-11(食管癌细胞) ATCC
SK-BR-3(乳腺腺癌细胞) ATCC
SK-BR-3(乳腺腺癌细胞) ATCC
TE-10(食管癌细胞) ATCC
ZR-75-30(乳腺癌细胞) ATCC
TE-1(食管癌细胞) ATCC
Bcap-37(乳腺癌细胞) ATCC
Eca-109(食管癌细胞) ATCC
MDA-MB-453(乳腺癌细胞) ATCC
CNE(鼻咽癌细胞) ATCC
JAR(胎盘绒毛癌细胞) ATCC
HEp-2(喉表皮样癌细胞) ATCC
NIH:OVCAR-3(卵巢癌细胞) ATCC
KB(口腔表皮样癌细胞) ATCC