DH5α λpir感受态细胞

DH5α λpir感受态细胞
DH5α λpir Chemically Competent Cell

产品货号： JLC-G018               

保存条件： -80℃   

产品规格 :  10×100μl  100×100μl

产品介绍：
 
基因型 :  

F- φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) LAMpir U169 endA1 recA1 hsdR17(rk- ,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA

简单说明 : 

DH5α λpir 菌株来源于 DH5α，在 DH5α 大肠杆菌基因组中引入 LAMpir，即为 DH5α λpir，该菌株可以表达 PIR 蛋白，使得含有 R6Kg ori 复制子的质粒可以在其中正常复制。 DH5α λpir 菌株缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质 粒 DNA 的产量和质量；重组酶缺陷型 (recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入 DNA 的稳定性； lacZΔM15 的存在使 DH5α 可用于蓝、白斑筛选；但 DH5α λpir 菌株生长速度较慢，在平板培养或液体摇菌时应 延长生长时间。生物开发的 DH5α λpir 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率>1×109 cfu/μg DNA。

操作说明 : 

1. DH5α λpir 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA（质粒或连接产物）并 用手拨打 EP 管底混匀，冰中静置 25 分钟。 

2.  42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。 

3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (LB)，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 70 分钟。 

4. 5000 rpm 离心 1 分钟收集菌体，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 LB 培养基上。 

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱至少 18 小时。

注意事项 : 

1. 感受态细胞Z好在冰中缓慢融化。插入冰中 8 分钟内加入目标 DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降 低转化效率。

2. DH5α λpir 菌株生长缓慢，在平板上培养或液体摇菌时应延长菌体生长时间（37℃，18 小时以上）。 

3. 转化高浓度的质粒或GX率的连接产物可相应减少用于涂板的菌量。