病毒产品在肝脏中的应用

首先，肝脏研究如何选择合适的病毒载体
慢病毒、腺病毒和腺相关病毒（AAV）等都是常用的工具病毒载体，在肝脏研究中如何选择合适的病毒工具呢？

1. 慢病毒：慢病毒具有毒性低、损伤小的特点，且病毒感染细胞后，可以整合入基因组长期表达，是细胞实验的选择。应用于在体注射时，引起的免疫反应较为温和。
2.  腺病毒：腺病毒载体容量大，不整合到染色体中，无插入致突变性。但表达时间短，在大部分细胞中，腺病毒可维持7-14 天的表达时间。且免疫原性高，应用于在体注射时易造成炎症反应。
3.  腺相关病毒AAV：AAV 体积小，滴度高，扩散性好，是在体实验的选择。AAV有多种血清型，不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力，其中AAV2型、8型、9型等对肝脏有较好的趋向性。


了解了这些病毒载体在肝脏研究中的优势和不足后，如何根据实验目的来挑选合适的基因操作工具呢？建议您可以从以下这几个方面出发:

1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符；
2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合；
3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够GX。


                                          常用基因操作工具选择指南

 

吉凯小建议：

1.  在基因大小允许的前提下，在体实验建议优先选择腺相关病毒（AAV）。AAV具有滴度高，扩散效果好，免疫原性低等特点，且AAV有多种血清型，2型、8型、9型等对肝脏有较好的趋向性。点击了解更多AAV血清型选择小窍门>>

                                               AAV 血清型的趋向性

2.  细胞体外感染建议选择慢病毒：慢病毒在感染细胞后2-4 天开始表达，且对细胞毒性低、损伤小。

3.  如需目的基因在肝脏中特异性表达，可使用组织特异性启动子，如肝脏特异性启动子TBG。吉凯提供组织特异性启动子载体的病毒包装服务，点击了解>>
 

注射方法

病毒工具在肝脏中的的注射方法
肝脏常用的注射方法有尾静脉和肝门静脉注射，两种注射方法用量类似。下面以肝原位注射为例详细说明。
1. 腹部切开后，寻找到肝门静脉：将肝叶提起，下面就是门静脉，因为下腔静脉在后方，离肾脏比较近，所以，一般看到的大的静脉就是门静脉。
2. 注射病毒，穿刺后压迫止血。



                                          肝门静脉病毒注射示意图

更多工具病毒体内注射实验操作视频，点击查看>>

 

用量参考

肝脏注射病毒用量参考
以下表格中注射参数来自吉凯客户发表文献。更多肝脏病毒注射参数，点击查看与下载>>

1. 慢病毒


代表文献（31）吉凯客户文章Jourmal of viology,2016,90(4):1729-1740



2. 腺病毒



代表文献（36）吉凯客户文章Laboratory Investigation,2017,97(9):1020




3. 腺相关病毒




代表文献（37）吉凯客户文章Cellular physiology and biochemistry,2016,40(5):1117



引用文献

1. The histone demethylase KDM4D promotes hepatic fibrogenesis by modulating Toll-like receptor 4 signaling pathway. 2018, EBioMedicine (IF= 6.183)
吉凯产品：AAV。血清型：AAV9。研究领域：肝纤维化。复旦大学附属华东医院。
2. Mesenchymal Stem Cells with Enhanced Bcl-2 Expression Promote Liver Recovery in a Rat Model of Hepatic Cirrhosis. 2016, Cellular Physiology and Biochemistry (IF=5.5)
吉凯产品：AAV。研究领域：肝硬化。哈尔滨医科大学附属第二医院。
3. Hepatitis B virus X protein induces hepatic steatosis by enhancing the expression of liver fatty acid binding protein[J]. 2016, Journal of virology (IF= 4.368).
吉凯产品：慢病毒。研究领域：肝脏脂肪变性。福建医科大学。
4. Decreased MiR-155 level in the peripheral blood of non-alcoholic fatty liver disease patients may serve as a biomarker and may influence LXR activity[J]. 2016, Cellular Physiology and Biochemistry (IF= 5.5).
吉凯产品：microRNA腺病毒。研究领域：非酒精性脂肪性肝。南京中医药大学第二临床医学院。




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