石蜡包埋组织DNA提取试剂盒（二甲苯脱蜡)

特别提示：包括石蜡包埋组织DNA提取试剂盒（二jiǎ苯脱蜡)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：石蜡包埋组织DNA提取试剂盒（二jiǎ苯脱蜡)
英文名称：DNA extraction kit from Paraffin-embedded tissue
产品货号：WH0015
产品规格：50次

本试剂盒采用二jiǎ苯脱蜡方式去除石蜡，应用特殊的裂解条件释放组织切片中的DNA，克服了交联造成的YZ效应。该试剂盒通过特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，将高品质的DNA纯化至小洗脱体积中。FFPE DNA提取提取的基因组完整性好，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的FFPE DNA可适用于多种下游应用，如PCR和real-time PCR；SNP基因分析STR基因分析；药物基因组学研究。

产品特点：
·样本广泛：可从固定、石蜡包埋组织，等固定液中的组织中分离纯化基因组DNA。
·轻松提取：轻松提取纯化高品质，高得率的即用型DNA，结果重复性好。
·稳定可靠：彻底去除污染物和PCRYZ剂。

试剂盒组成：

组分	50T
缓冲液GA	15ml
缓冲液GB	15ml
缓冲液GD	13 ml
漂洗液PW	15ml
洗脱缓冲液TE	15ml
Proteinase K	1 ml
RNase-Free吸附柱CR2	50个
收集管（2ml)	50个

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．拿到样品后要尽快在4-10%的中固定，固定时间以8-24h内为宜，时间过长导致基因组断裂，影响下游实验。
2．确保包埋前的样品彻底脱水，残留的会YZPCR检测酶的作用。
3．本产品适用于医学、科学实验研究。
4．本产品所提DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久（＞1年）则易导致DNA完整性受损，无法扩出长片段。
5．若缓冲液GA、GB、GD中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
6．试剂盒中各试剂在使用前应按照说明书要求操作。

使用方法：
次使用前应按照试剂瓶标签的说明在GD和PW中加入无水乙醇!所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1．样本处理
  a．石蜡切片：取石蜡切片（5-10μm厚，1×1cm2大小）5-8张。
  b．石蜡块：手术刀刮取约30mg的组织样本（尽量去除多余的石蜡）。
  注意：如果样品表面暴露于空气中，zuì初刮取的2-3片弃掉不用。
  c．等固定液中的样本：取30mg样本，用手术刀切为数块,置于1.5 ml离心管中,加入500μl PBS （10mM，pH7.4)涡旋振荡混匀,12000rpm（~13400×g )室温离心1 min,弃上清，重复3次,然后从步骤7开始操作。
2．将石蜡切片或石蜡块样本装于1.5 ml无菌离心管中，加入1 ml二jiǎ苯，剧烈涡旋10 sec。
3．12000rpm（~13400×g )室温离心2 min，弃上清。注意：不要倒掉沉淀。
4．在上述管中加入1 ml无水乙醇，涡旋混匀10sec。
5．12000rpm（~13400×g )室温离心2 min，弃上清。注意：不要倒掉沉淀。
6．室温放置5-10min，充分挥发乙醇。
7．加入200 μl缓冲液GA和20 μl Proteinase K，充分混匀，56℃孵育1 h直至样本完全裂解。
8．置于90℃孵育1 h。
9．（可选步骤）如果要去除RNA，可以将样品中加入2 μl RNase A（100 mg/ml），室温孵2 min后，进行下一步操作。
10．在上管中加入220 μl缓冲液GB涡旋混匀，再加入250 μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀，短暂离心使管壁上的溶液收集到管底。
11．将上一步所得的混合液加入一个吸附柱CR2中8000rpm（~6,000×g ）室温离心2 min，倒掉废液，重新将吸附柱放回收集管中。
  注意：吸附柱zuì大容量为700 μl，可将剩余液体重复上述步骤上柱。
12．向吸附柱CR2中加入500μl缓冲液GD，8000rpm（~6,000×g ）室温离心60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
13．向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW，8000rpm（~6,000×g ）室温离心60 sec，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
14．重复操作步骤13。
15．将吸附柱CR2放回收集管中，12000rpm（~13400×g )离心2 min，倒掉废液。将吸附柱开盖置于室温放置2-5min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：乙醇残留会YZ后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
16.将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加65℃预热的30-100 μl洗脱缓冲液TE或ddH2O洗脱，室温放置2-5 min，12000rpm（~13400×g )离心2min，将收集有DNA的离心管-20℃保存。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于30 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g )离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

我公司销售的石蜡包埋组织DNA提取试剂盒（二jiǎ苯脱蜡)，石蜡切片DNA提取试剂盒质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。