产品简介
本产品采用了独特的双组分热启动DNA 聚合酶进行PCR扩增,通过在PCR 反应液中加入荧光探针,然后检测反应进程中的荧光强度,达到检测PCR 产物扩增量的目的。
1. 本产品中双热启动酶构成了独特的酶活自动调节系统。酶活自动调节系统是由化学修饰的HotStar Taq DNA 聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA 聚合酶组成,使SuperRealPreMix 在整个PCR 反应过程始终保持的DNA 聚合酶活力,配合精心优化Buffer 体系,从而具有定量准确,扩增效率高,重复性好和宽广的可信范围的特点。
2. 本产品经过优化特别有利于Taq 酶发挥其5’-3’外切酶活性,使荧光信号的释放达到的效果。此外,SuperRealPreMix(Probe) 也充分降解了探针荧光淬灭基团的信号释放,经过上述优化, 用相同量的模板将得到更强的信号。
试剂盒特点
■ 双核优势:双酶热启动系统,稳定性强,数据更准确。
■ 线性检测范围宽:可至少达107 的线性检测范围。
■ 灵敏度高:可检测病毒,微生物等低丰度模板。
■ 扩增能力强:荧光信号更强。
储存条件
收到本产品后, 请立即置于-20℃保存。从-20℃取出使用时, 将冻存的2×SuperReal PreMix(Probe)和50×ROX Reference Dye融解,然后轻轻颠倒混匀,待溶液完全均一后再行使用。如解冻后没有使用,须彻底混匀后重新冷冻。(在解冻过程中盐会出现分层现象,未混匀进行冷冻,盐晶体的析出将会对酶造成损害)。如需一段时间内经常取用,可在2-8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。
注意事项
■ PCR 反应的预变性条件必须设定为95 ℃ 15min,用以激活热启动酶。
■ 如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀,请不要使用振荡器进行混匀,尽量避免出现泡沫,并经瞬时离心后使用。
■ 引物终浓度为300 nM,探针终浓度为200 nM 可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。
■ 需要进一步优化引物浓度的,可以在50-900 nM范围内调整;需要进一步优化探针浓度的,可以在100-500 nM 范围内调整。
■ 20 μl 反应体系中,基因组DNA 或cDNA 模板的使用量一般小于100 ng,逆转录产物作为模板时,使用量应不超过PCR 体系终体积的20%
温馨提示:不可用于临床ZL。